histone1回复于2015/04/03
光散射 --- 绝对分子量
传统 ---- 相对分子量
实际使用时,光散射不用做校正曲线,但是在数据处理时对于需要使用者有一些要求。
小不董回复于2015/04/14
分析性的PGC,现在慢慢开始流行用多检测器连用,也就是有传统的GPC,配置了比如紫外或RI示差检测器作为浓度检测器,再加上多角度或小角度激光光散射检测器,有的还配置了粘度检测器,原理上有了浓度检测器和激光光散射检测器就能测出绝对分子量了,但激光光散射检测器也有个极限,分子小于1万就不是那么准确,分子小于一千了的就检测不了信号。
也有一种想楼上说的,静态光散射检测器,对比较单一的高分子分子量测定比较好。
tigertooth回复于2015/04/29
光散射测小于1000的肯定很难,但1K-10K的如果dn/dc比较大,并不难。
关于单一的高分子静态好测也是一个偷换概念,因为很多有复杂的样品人对自己的样品就是两眼一抹黑,一问一瞪眼,所以他无法很好找到测试条件和利用光散射的数据。
其实从比较实用的角度来说:
GPC得个结果很简单,管它条件合适与否,标曲做了多久,打一针,肯定能给你个结果,学生们都超喜欢。
但如果你真正想搞清楚样品的分子量及一些东西,光散射肯定是非常有用的,但难点是往往测试条件很难找,比如柱子、流动相的选择。
当然还有价格因素。
原文由 上海魁元(SH101501) 发表:
不完全是价格问题,无论是绝对分子量还是相对分子量都可以用。当然绝对分子量的数据更好些,不过动态光散射测分子量需要除尘,因此也会有一定干扰,所以用的人较少;GPC方便快捷,但由于标样往往和样品结构有一定差距,因此结果多有偏差。
用绝对分子量和相对分子量比较没有意义,因为理论方法完全不同,差距很大也是正常的。
你选择一个数据即可,不过比较不同样品分子量时,一定要采用同样的测量方法