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液相色谱（LC）

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主题：【已应助】色谱柱参数对分离效果的影响

浏览0 回复25 电梯直达

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又又1990

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2015/4/26 19:47:13 11楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 一片枫叶(v2960432) 发表:
您过奖了，还有很多知识向您请教，望多关注指导！

反啦！还需要您多指导呢！

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夏天的雪

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2015/4/26 20:01:38 12楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 一片枫叶(v2960432) 发表:
您谦虚了，相互学习！低于3um的填料粒径，如果再用0.45um的滤膜过滤，就要考虑色谱柱的堵塞问题了。

那就需要用更小孔径的滤膜了，例如0.22um的滤膜

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2015/4/26 20:05:29 13楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 又又1990(v2984502) 发表:
哇塞，都上升到原理图了。话说填料都是规整填料吗？

枫叶版主厉害！规整球体应该是做填料的目标吧

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夏天的雪

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2015/4/26 20:07:24 14楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 一片枫叶(v2960432) 发表:
从色谱柱筛板的选择来看，也是低于色谱柱填料颗粒之间的孔径的。

筛板孔径太大，填料就可能跑出来了，而且容易堵塞筛板

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一片枫叶

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2015/4/26 20:09:01 15楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 夏天的雪(bingwang228) 发表:
那就需要用更小孔径的滤膜了，例如0.22um的滤膜

应该是那样，对于小粒径色谱柱就要使用，0.22um的滤膜过滤流动相了。

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夏天的雪

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2015/4/26 20:55:44 16楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 一片枫叶(v2960432) 发表:
应该是那样，对于小粒径色谱柱就要使用，0.22um的滤膜过滤流动相了。

如果是缓冲盐析出，或者样品在色谱柱中析出，那么即使过滤也可能会出现色谱柱堵塞

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一片枫叶

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2015/4/26 21:23:17 17楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 夏天的雪(bingwang228) 发表:
如果是缓冲盐析出，或者样品在色谱柱中析出，那么即使过滤也可能会出现色谱柱堵塞

那就是预柱的责任了。

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mouji

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2015/4/27 12:42:29 18楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

学习学习！

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夏天的雪

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2015/4/27 13:13:50 19楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 一片枫叶(v2960432) 发表:
那就是预柱的责任了。

用了预柱能阻挡一部分强保留物质和颗粒物质，但也不能完全阻挡盐析或者样品析出吧

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dywzqbx

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2015/4/27 14:59:55 20楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 一片枫叶(v2960432) 发表:
假设：色谱柱填料为规则的均匀的球形填料，其粒径假设为D，流动相含的颗粒也为圆形颗粒，其粒径假设为d，
那么：通过填料空隙的流动相的颗粒孔径d与填料粒径D，通过平面几何推算有下列关系：

根据上述公式，可以算出各种不同的填料粒径所对应的孔径的大小。
如果，填料的粒径为D=4um，那么，其孔径只有d=0.62um，即时使用0.45um的滤膜过滤l流动相，也不会堵塞色谱柱的。

实验室常用5um填料分析色谱柱为100埃，大约为10nm，0.01um；按照你给出的公式得到的是0.775um，远远大于色谱柱标识，请问这又是什么原因呢？