主题：【分享】色谱图中出现与待测化合物标准品保留时间相近的色谱峰时，该如何定性？

原因
气相色谱分析中，如果复杂样品基质中某个成分与待测化合物性质相似或接近，就会在色谱出峰上相接近，从而在色谱图中出现与待测化合物对照品保留时间相近的色谱峰。对于这些峰，我们经常会因为保留时间不一致，而定义为杂质峰，不予考虑。
但是，实际上仅仅依靠色谱峰保留时间判断，会出现误判，尤其对一些容易出现基质效应的化合物如乙酰甲胺磷、氧化乐果等，这种情况更是经常出现。
解决方案
    分析中为了避免出现假阴性结果，首先我们可以考虑通过基质标准来定性定量分析，看峰形是否变化，如果有变化，可认为存在基质效应，此时更应该注意；然后考虑调整色谱升温程序（加快或减缓），看能否完全分开；再次，通过双柱双检测器法确证；最后，可利用GC-SIM-MS或GC-MS/MS方法来进一步确证分析，保证结果可靠。
案例分析
①利用GC-MS/MS确证假阴性结果
佟玲等在分析尖椒中甲胺磷残留时，发现由于存在基质效应，标准品色谱峰严重拖尾的现象在样品中不存在，导致样品基质中色谱峰与待测化合物标准品色谱峰保留时间有差别，且峰形也不一样，见图1（A、B），仅靠保留时间判断，会判定该样品为阴性样品。
但是通过选择CI电离模式下的甲胺磷准分子离子峰m/z 142为母离子，建立MS/MS方法分析，发现质谱图中都含有m/z 125、m/z94等特征子离子，见图1（C、D），证明该尖椒样品中确实含有甲胺磷，为假阴性，说明之前判定该样品为阴性样品是错误的。

图1  尖椒样品中农药甲胺磷残留确证分析

A：甲胺磷标准品色谱图；B：尖椒样品色谱图；C：甲胺磷标准品MS/MS质谱图；D：尖椒样品MS/MS质谱图

②利用双柱双检测器确证
李继革等用气相色谱法测定蔬菜中55种有机磷农药残留时，在DB-1701色谱柱上，第一组共35种有机磷农药能达到较好分离，第二组共20种有机磷农药，其中18种能较好分离，但马拉硫磷与溴硫磷完全重合，见2（DB-1701 A、B）；
在HP-5色谱柱上，马拉硫磷与溴硫磷可以分离，见2（HP-5 A、B）。因此对马拉硫磷和溴硫磷定性定量确证，需要DB-1701-FPD与HP-5-NPD相结合。

图2  35种和20种有机磷农药在DB1701与HP-5色谱柱上的色谱图

③利用AMDIS确证假阴性结果
韭菜含大量有机硫化合物和其它干扰物质，严重影响农药残留分析。使用仅对P 元素有响应的FPD 检测器仍不能去除韭菜样本对农药峰产生的干扰，见韭菜空白样本FPD 色谱图3（A）。且韭菜对NPD和ECD检测器等其它选择性检测器也有干扰，使用非选择性的检测器, 基质干扰更为严重。
图3（B）为韭菜假阴性样本GC-MS总离子流色谱图。图3（C）为韭菜样本的GC-MS局部放大图，保留时间为29.80min的对硫磷峰完全被29.74min的杂质峰所掩盖。29.80min处对应质谱图见图3（E），表明对硫磷特征离子m/z 263、m/z235、m/z 186和m/z 155“淹没”于干扰离子中。
为解决基质干扰问题, 采用AMDIS对GC-MS全扫描文件进行处理。首先用GC/M S分析每种农药的标准样品, 采集各成分质谱图, 建立农药谱库；而后利用GC/MS分析韭菜空白样品和添加样品，采集每个离子的质量色谱图, 并用AMDIS将所有保留值和形状相同的质量色谱峰的离子组合成一张质谱图, 从而排除干扰, 重建质谱图。
图3（D）为29.60～29.90min时间内的总离子流色谱图和提取离子流色谱图(m/z235、m/z242、m/z263和m/z291)。碎片离子m/z235、m/z263的峰形和保留值与分子离子峰m/z291完全相同，碎片离子m/z242的峰形和保留值与前三者不同, 说明离子m/z242不是对硫磷的碎裂离子。AMDIS将m/z235、m/z263、m/z291离子保留, 去除m/z 242离子，建立一张新的质谱图，见图3（F）。比较图3（E）和3（F），经过AMDIS处理的质谱图得到了明显的净化, 在NIST谱库中检索有更好的匹配度，NIST标准谱库中对硫磷质谱图见3（G），定性结果更准确。AMDIS有效去除了基质干扰，同时可以获得比选择离子技术更多的信息量，确证更准确。

图3  利用GC-MS-AMDIS确证韭菜样本中对硫磷残留