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毛细管电泳（CE）

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主题：【讨论】谈谈蛋白质基质干扰问题

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老多_小多

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发表于：2015/07/17 17:13:29 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

都知道毛细管电泳可以分析多肽和蛋白质，
但是，如果我要测其他的组分，比如维生素或者有机酸，蛋白质是不是会干扰呢？
一起来说说检测经历
谈谈蛋白质基质干扰问题，会存在吗？

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2015/7/17 23:21:18 沙发管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

非常好的问题！

首先明确一下概念。你说的基质效应，英文名是matrix effect，最常出现在质谱检测上。指的是样品中存在的目标检测物之外的复杂物质对检测灵敏度和分离度等所产生的干扰作用。这些干扰物质较为常见的是样品中大量盐的存在所产生的干扰。

英文名很明确，但中文名我有点搞不清。因为除了“基质效应”的叫法，也有见到说“基体效应”的。虽然英文名还是一样，但似乎中文当中，说“基体效应”的更多是用在CE和HPLC等色谱分离上，而基质效应则更多用于质谱检测上。具体这两者有没区别，我还真说不准。

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2015/7/17 23:29:48 板凳管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

因为中文名不明确，所以我用英文名好了。matrix effect普遍存在于中药、蛋白质、生物样品等样品当中。对分离和灵敏度有很大的影响。这就是为什么我们明明用标准物质优化出来的方法，到了实际样品那就出现各种问题的原因。

克服的方法，可以提纯，但是提纯过程中很容易造成损失。如果是盐的影响就除盐，除盐方法很多，这个影响相对比较容易消除。如果不想太麻烦给样品提纯或者除盐，为了准确检测，可以采用标准加入法，但样品量大的时候采用这个方法是会累死一头老黄牛的。另外最常用也是最有效的，就是内标法。这个方法总体比较简单，但内标物要找准，必要的时候一个样品当中需要添加两个以上内标物。

但是，话说回来，如果matrix effect严重拉低了峰高或严重降低了分离度，导致峰面积已经不落在线性范围内了，那最后还是要乖乖提纯的。

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