3.峰形问题
理论的峰形是高斯峰形，但在实际测试中，峰都会有点拖尾。当峰形严重变形时，就意味某些地方出现了问题，需要去调整。我们经常遇到的峰形问题有：部分峰拖尾，前伸和所有的峰拖尾这三种情况，哪么如何解决呢？在开始之前先看一下如何计算峰的对称性
1计算峰的对称性
计算峰的对称性的方式有两种：拖尾因子（Tailing fact）和对称因子（Asymmetry factor）
拖尾因子是美国药典规定用于评价峰形对称性的一个参数，其计算公式为 Tf ＝（A+B）/ 2A。拖尾因子的计算公式中 A 和 B 的数值如图 1 所示，从色谱峰的顶点作一条直线与基线垂直，再于峰高 5% 处作一条与基线平行的直线，与垂线相交于点 o，与峰的两边分别相交于点 a 和 b，以 A 表示 oa 的长度，以 B 表示 ob 的长度。
不对称因子的概念与拖尾因子接近，二者的区别主要有两个：1) 计算公式不同 As＝B/A；
2）用于计算的 A 和 B 的取值方位不同，不对称因子是以峰高 10% 处来计算的。图 1 可清楚的说明它们之间的相互关系。

如 Figure2所示：正常的 TF的范围是 0.9<TF<1.2,如果TF继续增加，那么峰形将会拖尾的更加严重，此时峰会变的很宽，那么将会很难确定峰的终点，对积分造成影响，另外对于分离度不高的色谱，峰变宽也会造成峰更加难分离，同时随着峰变宽的同时，峰高也会降低，那么更容易受到基线的干扰。如果 TF》2时，就要采取一些措施去优化峰形。

2只有一个峰或者部分峰拖尾
出现这种情况，很有可能是系统中某些化学特性发生了改变。
首先去check 流动相，流动相的pH或缓冲盐浓度的改变都会影响到峰形，此时伴随的可能还有保留时间的变化。
更换了新的流动相，如果问题已经存在，哪么就要去check你的柱子，如果使用了保护柱，就先更换新的保护柱，然后再更换新的柱子
3峰前伸（peak fronting）
峰前伸的情况很少遇到，之前在《柱过载 or 检测器过载》中提到过柱过载会造成峰前伸，伴随的还有保留时间的提前
另外一个可能造成峰前伸的原因是柱子塌陷，如figure 4所示，第527针进样峰形是正常的，但在第528针进样峰形严重前伸，柱子要求的使用条件是 ph ≤ 7 and ≤ 40°C.，而实际使用的 ph ≤ 9.6 and ≤ 70°C.，如此恶劣的条件会慢慢的溶解柱子的固定相，最终造成柱子固定相的塌陷。

3所有峰拖尾

如图5所示，出现这种情况极有可能是柱子的inlet 堵塞，试着去反冲柱子看是否能够解决问题，如果不行，就要更换新的柱子。
如果出现了这种情况，要去check一下所用的流动相和样品，找出柱子堵塞的原因。
4.Best Practices
好的操作习惯可以总结为三点：
Degassing（脱气），Filter（过滤），Flush（冲洗）

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主题：【分享】优秀的液相操作必须知道的四点（二）