主题：【已应助】离子对流动相求色谱柱推荐

您好～请问您判断色谱柱报废的标准是什么呢？
我看您的流动相条件是97%的水相，
初步判断可能是长期在高水相条件下使用会导致一般的硅胶填料色谱柱柱效下降，
您在分析时是否出现了保留时间缩短的现象呢？
这可能就是由于这个色谱柱不耐受长期在高水相条件下使用造成的～

原文由 capcellpak(capcellpak) 发表:
您好～请问您判断色谱柱报废的标准是什么呢？
我看您的流动相条件是97%的水相，
初步判断可能是长期在高水相条件下使用会导致一般的硅胶填料色谱柱柱效下降，
您在分析时是否出现了保留时间缩短的现象呢？
这可能就是由于这个色谱柱不耐受长期在高水相条件下使用造成的～

报废的概念是柱效降低，色峰谱峰展变宽或拖尾或分叉

原文由 牛一牛(v2700892) 发表:
报废的概念是柱效降低，色峰谱峰展变宽或拖尾或分叉

在使用添加了离子对试剂的流动相时，如果出现分叉峰，有可能是色谱柱平衡不充分够造成的，建议进行充分平衡，比如低流速过夜平衡这样；
离子对试剂在使用中是一个动态平衡的过程，所以平衡不充分或者实验完毕后冲洗色谱柱的操作都会导致色谱柱使用中的不稳定。
不过当然也有可能是色谱柱使用寿命缩短导致的，这种时候就只能更换新的色谱柱了～
您这边是哪种情况呢？有整体保留时间缩短的现象吗？

原文由 牛一牛(v2700892)发表:

原文由  capcellpak(capcellpak) 发表:
您好～请问您判断色谱柱报废的标准是什么呢？
我看您的流动相条件是97%的水相，
初步判断可能是长期在高水相条件下使用会导致一般的硅胶填料色谱柱柱效下降，
您在分析时是否出现了保留时间缩短的现象呢？
这可能就是由于这个色谱柱不耐受长期在高水相条件下使用造成的～

报废的概念是柱效降低，色峰谱峰展变宽或拖尾或分叉

您说的情况全都考虑了，而且每次都平衡一夜半天，每次冲洗也都是200倍柱子体积，已经非常谨慎，但还是很废柱子。就是想请大家帮忙提供一个耐水又耐离子对的色谱

原文由 牛一牛(v2700892)发表:

原文由 牛一牛(v2700892)发表:

原文由  capcellpak(capcellpak) 发表:
您好～请问您判断色谱柱报废的标准是什么呢？
我看您的流动相条件是97%的水相，
初步判断可能是长期在高水相条件下使用会导致一般的硅胶填料色谱柱柱效下降，
您在分析时是否出现了保留时间缩短的现象呢？
这可能就是由于这个色谱柱不耐受长期在高水相条件下使用造成的～

报废的概念是柱效降低，色峰谱峰展变宽或拖尾或分叉

您说的情况全都考虑了，而且每次都平衡一夜半天，每次冲洗也都是200倍柱子体积，已经非常谨慎，但还是很废柱子。就是想请大家帮忙提供一个耐水又耐离子对的色谱

我怎么觉的是冲洗的太多造成柱流失。

每次都平衡一夜半天，用的是多大流速？

原文由 青林(wyqql2060) 发表:
每次都平衡一夜半天，用的是多大流速？

初始流速是0.5左右，分析样品提前2个小时把流速调整至1.0

以楼主的流动相组成，水相比例太大，普通的C18很容易报废，保留时间容易漂移。
楼主去买水相柱吧

可以打电话咨询waters、agilent等公司，问问有没有比较好的柱子推荐。

为什么流动相甲醇只有3%？为什么要用庚烷磺酸钠？
回答，因为检测的样品是碱性，为了增加保留，所以选择了庚烷磺酸钠，但是保留的还不太理想或是多个碱性样品分离度不够，所以只能降低甲醇的比例！这就是这个方法建立的原因！损伤柱子主要是庚烷磺酸钠造成的，二是水的比例太高！
如果要继续采用这个方法，我的建议是用最便宜的C18柱，比如国产C18柱，因为分离效果主要来自于磺酸根，用再好的C18柱效果也不会太好！ 并且最好选择碳载量大一些的！这样可以提高庚烷磺酸钠的与C18结合的牢固性！（你的流动相为什么过夜平衡，也是同样的目的）
比如国产的Kromasil，一千多一根即可！

我的建议是提高这个方法，一看到庚烷磺酸钠就知道是上世纪80-90年代时开发的方法了！目前有更多的新式色谱柱可以解决你这个问题！
1、选择宽pH C18柱，
在pH9-11左右来分析你的样品，流动相例如：乙腈 碳酸氢铵水溶液 pH10
比如Xbridge RP18， ACE SUPER C18, ECOSIL EXTEND C18, Gemini C18，Triart C18等等，性价比推荐ACE

2、用极性嵌入的C18柱，
纯水相，不加离子对和缓冲盐（我担心保留和分离度还是不够，但好处就是可以继续用你的色谱柱）
比如Symmetry shield RP18, ECOSIL EPS-C18, ACE C18-Amide, Alltima HP C18-EPS, Discovery RP-Amide C16 等等，性价比推荐EPS-C18以及Symetry

3、用HILIC来做，
乙腈和10-50mM醋酸铵水溶液，与C18出峰顺序会颠倒，填料改变太多，对实验人员的开发方法的能力要求比较高！
比如Atlantis HILIC，Merck Zic HILIC，Inertsil HILIC，Cosmosil HILIC等等，性能推荐Merck和价格推荐GL