主题:【求助】液相色谱梯度洗脱基线漂移的求助

浏览0 回复9 电梯直达
浪荡游龙
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各位前辈,我在做以产品HPLC色谱纯度的梯度洗脱时,基线漂移较大,且基线不能重现,时好时坏,请求各位前辈给予知道,是什么原因造成的,请求帮助解决。
梯度基线漂移
梯度基线正常
该帖子作者被版主 武灵3积分, 2经验,加分理由:鼓励发图求助
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安静旅行吧
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原文由 安静旅行吧(v3115342) 发表:
有气泡?????


系统内应该没有气泡进入。
如果有气泡进入应该有倒峰吧?
浪荡游龙
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是否与流动相有关系呢?
流动相:0.001M的磷酸溶液和乙腈的梯度,其中所用磷酸和乙腈为色谱纯,水为超纯水
梯度洗脱如下:
时间(min)    流量(ml/L)    0.001mol/L 磷酸溶液(%)    乙腈(%)    洗脱方法
0~2               1.5                                       60                             40                     等度
2~5                     1.5                                   60→45                   40→55         线性梯度
5~8                   1.5                                  45                             55                   等度
8~16             1.5                                   45→10                   55→90             线性梯度
16~25           1.5                                   10                                90                 等度
25~27           1.5                                 10→60                   90→40       线性梯度
27~40           1.5                                     60                             40                 等度

请各位前辈给指导下,感谢啊!
有水有渝
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上面两个图是同一个方法同一个样品做的结果吗?能走出下面那个图,应该说明梯度没有问题。
valorb
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原文由 valorb(654456) 发表:
应该不是方法参数的问题,很可能是泵那边


同一台HPLC走的,基线时好时坏,找不到问题,很是困惑。泵,是应该分析一下,谢谢啊。
浪荡游龙
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原文由 有水有渝(xky0230699) 发表:
上面两个图是同一个方法同一个样品做的结果吗?能走出下面那个图,应该说明梯度没有问题。
是的,是同一个方法在同一台液相机子上做的结果,不过是分2次做的,不同的流动相不同的时间。问题找不出来,不清楚是什么原因造成的,求帮助分析一下。
月旭-李良翔
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这个条件建议你加一个杂质捕集小柱,针对这种梯度中基线波动有一定效果,可以试试。
seannoy
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梯度洗脱时,尽量在测试序列前排几针空针,以平衡色谱柱,我一般都会拍2、3针,因为有时候前几针谱图会特别糟糕
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