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主题：PCR扩增温度的问题

浏览0 回复7 电梯直达
youyouya123
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发表于：2006/11/19 16:55:00 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
最近做ISSR-PCR,在确定PCR的预备实验中发现tm值在55以上的几个引物的退火温度竟然在35-38℃时最好,重复实验还是一样,但一般的资料中都说退火温度在40-60℃,出现这种情况正常吗?
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fzpanda
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2006/11/23 10:23:00 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
扩增温度应该一般只在1-2摄氏度左右，4-5好像太多了一点
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little_fish
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2006/11/26 19:52:00 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
一般来说退火温度在50-60℃，35-38℃的特异性太差，可信度太低了
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hi1688
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2007/1/13 16:22:00 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
同意楼上观点，如果不放心可以送去测序。
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xbb715
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2007/3/24 21:27:00 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
当然可以，不要只相信教条
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wensmarry
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2007/4/22 22:09:00 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
这是一种正常的现象
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gxfuq
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2007/4/24 16:41:00 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
那个温度太低了，似乎不能扩增
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gybgyb
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2007/4/25 20:01:00 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
不管怎么样，只要目的条带出来，而且准确，有何不可呢
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