主题:【求助】检测小鼠囊胚中热休克蛋白70的免疫电镜操作方法

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zhuomuniao
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大家好:
  我想利用免疫电镜检测热应激前后小鼠囊胚中热休克蛋白70的定位情况,有两种方案:
1.包埋前免疫电镜:胚胎经多聚甲醛-戊二醛混合液固定后,然后清洗,渗透,封闭,分别与一抗和二抗反应,然后再用锇酸固定,脱水,812包埋。
2.包埋后的免疫电镜:胚胎经多聚甲醛-戊二醛混合液固定后,脱水,体温包埋剂渗透,包埋,聚合,超薄切片,最后进行免疫染色。
  第一种方案:不知道热休克蛋白70的抗原性保存如何?另外,不知道免疫标记效果如何就进行包埋,是不是有点盲目?
第二种方案;超微结构和抗原性都保存较好,试验重复性好。但是包埋剂比较贵,而且本试验室没有聚合用的低温冰箱和紫外灯。
  请各位大虾帮帮我!
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本版来的大多数是做材料的,等等做生物样品的来给你解答吧。
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