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主题：【求助】HPLC 流动相用磷酸缓冲液对柱子损坏很大吗

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发表于：2019/06/11 16:23:50 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
我测得物质在210nm 有最大吸收，水相也试过甲酸 乙酸及缓冲盐 得不到想要的峰形，最后用磷酸二氢钾溶液 （30mM，用磷酸调pH2.5左右），有机相用乙腈，缓冲盐/乙腈比例 35/65，提前混合过 并没有晶体析出，因为知道缓冲盐容易堵塞柱子，测试完会用大比例水相冲一个小时，接着以大比例有机相充一会儿封存柱子；
今天有人给我说最好不要用磷酸盐缓冲液（但我觉得只能选磷酸盐 ，210nm 甲酸 醋酸缓冲液都不合适），说很有可能用一段就堵塞柱子，想问下大家 如果我按以上操作做测试得话，还是会对色谱柱有不可逆得损害吗？希望指导。
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hujiangtao
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2019/6/11 16:46:20 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
浓度别太大没问题
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welewolf
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2019/6/11 17:18:37 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
首先浓度低是没关系的，其次要看分离效果，如果只有磷酸盐效果好就不要想其他的了
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初心
m3170710
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2019/6/11 17:42:17 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
磷酸盐在低温时容易析出 ，柱温30摄氏度为好
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