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液相色谱（LC）
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主题：【求助】在进液相之前，应该如何平衡色谱柱

浏览0 回复4 电梯直达
Insm_5a16ac09
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发表于：2019/07/30 16:01:10 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
大神，在进液相之前，应该如何平衡色谱柱，流动相有盐和没盐各自需要如何平衡，如何判断是豆平衡好了，另外，使用完之后，如何冲洗啊，
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2019/7/30 16:11:54 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
不运行梯度的话，待基线平直后进一针样品，分离，峰形满意。就算柱子平衡了。
运行梯度的话，最好走一次梯度。待进线平直即可进行分析。
带有缓冲盐的流动相在实验结束后，应过渡到大比例水相冲一会柱子。再回到保存柱子的流动相。
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我是风儿
nphfm2009
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2019/7/30 16:16:33 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
用所使用的流动相来平衡，如果是梯度洗脱的话，就用梯度洗脱中的初始流动相来平衡，用流动相走半个小时，基线波动小就表明已经平衡了，有盐的冲洗：使用完后先水95%的水+5%甲醇冲洗1个小时，再用50%甲醇+50%水冲洗1个小时，再用100%甲醇来冲洗，没有盐的：则直接用50%甲醇+50%乙腈冲洗1个小时，再用100%甲醇来冲洗
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检测老菜鸟
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2019/7/30 17:25:01 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
最好是走一平衡，基线稳定就可以进样了，盐的冲洗楼上老师都讲的不错。
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sdlzkw007
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2019/7/30 22:16:20 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
关于平衡请关注基线平直与压力波动，如果两方面都可以了，根据流速和柱体积推算一下是否平衡好系统。冲洗请根据实验样品基质选择效果好的流动相对柱子进行再生，比如有食品基质采用磷酸盐缓冲溶液和乙腈作流动相分离检测那么最好是结束后马上100%纯水冲洗柱子10分钟。然后切换到纯水和乙腈做流动相冲洗2小时，转入100%甲醇封存柱子。
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