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液相色谱（LC）
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主题：【求助】样品无法达到分离，峰形杂乱求高人解答

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发表于：2019/09/11 13:14:33 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
我做的是制备色谱，多肽的纯化。流动相用的是  A相：0.05TFA/水  B相：0.05TFA/90%乙腈
用的是依利特的制备色谱，100mm的C18柱。后来通过摸索发现是B相出了问题，可是具体到底是什么问题不清楚。
附图：图1是流动相出了问题出来的图  图2是换了流动相后出来的图（图2是正常的图，蓝色圈圈内是我需要的样品峰。）后来检测过图1的每个峰，发现没个峰当周都有我需要的样品，样品没达到分离的效果。        请求高人解答疑难。
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2019/9/12 8:20:59 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
第二张图看着是正常的，你的样品里应该有跟目标物性质很相似的峰，把梯度调缓一些试试，如果加了柱温，把柱温调低点，再有长柱的话，试一下更长的柱子，或者你把乙腈改成甲醇试试。
这些条件都不可以的话，建议直接用质谱定量。
第一张图出现的情况，推测你是否重复进样了，前一针没有洗脱完全就进了下一针？
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2019/9/12 8:22:08 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由m3132337(m3132337)发表:第二张图看着是正常的，你的样品里应该有跟目标物性质很相似的峰，把梯度调缓一些试试，如果加了柱温，把柱温调低点，再有长柱的话，试一下更长的柱子，或者你把乙腈改成甲醇试试。
这些条件都不可以的话，建议直接用质谱定量。
第一张图出现的情况，推测你是否重复进样了，前一针没有洗脱完全就进了下一针？
也有可能柱子和系统刚开始没有平衡好而造成
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