主题:【已应助】氨基柱拖尾问题

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wangjun53022263
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各位老师,我正在做实验,分离低聚半乳糖,用的氨基柱,流动相乙腈:水=76:24,流速1ml/min,仪器使用的是waters公司的,进样浓度为0.15g/ml,进样体积为10微升,拖尾很严重,这个问题很久了,最近几个月一直是这样,请问是流动相配比不对导致的吗?没有过载吧,色谱仪是waters安装的,去年图谱很好,是柱子问题吗,但老师说柱子没用多久,应该没老化,若是机械方面问题,我们只是拆柱子,上柱子,有可能是哪里呢,请各位多多指教,谢谢
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junxi2008
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一、减小进样浓度看看,如果只是峰面积的变化,峰形没有变化,那么就要考虑污染的问题了。
二、清洗进样阀,看看能否得到解决,但我认为多数情况是柱头污染造成的;把柱头拆开,将筛板用稀盐酸超声30分钟、再用异丙醇超声10分钟、甲醇10分钟,连接柱头到泵上,大流量冲洗10分钟,然后再把柱头安装到柱上试试。
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