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主题：【已应助】DPPH又是用无水乙醇配的，正常情况下是会沉淀的吧？？？

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nizhongwen
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发表于：2020/01/17 13:13:34 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
今天做了多糖抗氧化测DPPH的实验，问题很多：
1、DPPH用无水乙醇溶的，然后实验出现了絮状沉淀。
2、空白组吸光度超过了1。
3、加了多糖样液的部分样品吸光度超过了空白。
多糖制备的时候是用醇沉的，多糖不溶于醇，DPPH又是用无水乙醇配的，正常情况下是会沉淀的吧？？？有没有办法解决这些问题呢？？？求教大神们了，很急啊！
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2020/1/17 13:35:28 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
我也有用DPPH自由基来测样品的抗氧化能力，浓度为0.1mM的DPPH无水乙醇溶液在517nm下吸光度是0.9以上，所以不加抗氧化剂的空白对照中DPPH的浓度为0.1mM较好。我是用0.2mM的DPPH溶液和待测样品同体积混合。针对你的问题：1 出现絮状物应该是溶解问题：可能你的糖提取液跟DPPH溶液不能混溶，也可能反应产物不能很好溶解，还可能。。。；2 浓度为0.1mM的DPPH无水乙醇溶液在517nm下吸光度由于仪器、参比等客观条件也可能会大于1，我实验数据也有稍大于1的；3吸光度大于空白，可能是因为你体系形成的絮状物造成的干扰，原则下，分光光度法要求待测液是溶液（也就是要澄清透明的）。希望对你有帮助。
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