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主题：【已应助】有没有做肌球蛋白凝胶的啊，为什么我配制的肌球蛋白溶液在加热后无法形成凝胶呢

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nizhongwen
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发表于：2020/04/14 13:47:39 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
有没有做肌球蛋白凝胶的啊，为什么我配制的肌球蛋白溶液在加热后无法形成凝胶呢
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2020/4/14 13:50:48 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
实验步骤如下：1、肌球蛋白的制备
新鲜绞碎的鱼肉中加入 5 倍（m/v）含有50mmol/LNaCl 的 20mmol/L 磷酸盐缓冲液（pH6.8），匀浆，5000?g，4℃条件下离心15min 弃去上清液，按上述步骤重复操作 2 次。收集的沉淀加入 10 倍（m/v）0.6mol/LNaCl，溶液（pH7.0），匀浆，10,000?g，离心 10min（4℃），上清液用尼龙网过滤去除结缔组织后加入 3 倍体积的冷蒸馏水稀释蛋白溶液使肌动球蛋白沉淀，然后 10,000?g，离心20min（4℃）收集肌动球蛋白沉淀。
2、肌球蛋白凝胶的制备
将上述提取出的肌球蛋白及配制成2%、4%的蛋白溶液水浴加热至90℃，保温10min
但是无法形成凝胶，只是产生了一些蛋白聚集物
供参考
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