主题:【已应助】气质检测 短链脂肪酸

浏览0 回复14 电梯直达
Ins_506400ac
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大家好,我最近要测细胞内短链脂肪酸(细胞是从transwell板上刮下来的),没有接触过这个,网上搜了也没有关于细胞内的测定,希望大家能指导一下,关于前处理的方法,上样 操作步骤,因为细胞实验养起来周期太长了也很麻烦,传代加铺板的时间养好一波得一个多月了。不敢贸然操作啊。。谢谢了
推荐答案:歌名回复于2022/03/16
这个简单,直接细胞直接低温冷冻研磨破碎,然后甲酯化衍生,乙酸乙酯提取就可以
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123
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歌名
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这个简单,直接细胞直接低温冷冻研磨破碎,然后甲酯化衍生,乙酸乙酯提取就可以
wuyuzegang
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可以参考一下!
①将细胞或者组织的混合物(<50ul)放入气象色谱样品处理玻璃瓶中,加入1ml正己烷(食用植物油的提取剂)。
②继续加入1ml含14%三氟化硼的甲醇溶液(现成试剂)。
③用氮气挤出玻璃瓶中的空气(2-3min),密封,将玻璃瓶沸水浴100℃ 1小时,冷却到室温。
④冷却后的玻璃瓶中加入1ml的H2O混匀,1000rpm离心1分钟。
⑤将上层的正己烷吸出放入气象色谱上样瓶中,在氮气中浓缩(用氮气吹干)。加入600ul正己烷,等待上机。
                                      ——A simplified method for analysis of polyunsaturated fatty acids
深蓝
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Ins_506400ac
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原文由 123(m3149125) 发表:
可以参考一下
看了 没有关于细胞的哇  谢谢
深蓝
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短链脂肪酸不建议直接上气质,最好是衍生化之后再测试,提取方法很多,可参考上面的资料
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2022/3/16 10:59:36 Last edit by mitsumi
安平
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        多检索一下文献为好。


        短碳链的脂肪酸,可以提取后直接用GC或者GCMS测定的,可以考虑使用FFAP毛细管柱。
Insm_118f144e
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matel_slug
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SkytheSg
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以前做过,但是忘记了。记得有做衍生化,搜下文献吧,很多
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