主题:【已应助】保健食品乳杆菌检测

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冰饼兵
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保健食品中仅含有乳杆菌和双歧杆菌两种有益菌。根据GB 4789.35-2016标准,乳杆菌数量等于乳酸菌总数(MRS平板计数结果)减去双歧杆菌数量(改良MRS平板计数结果)?会出现减成负数的结果吗?
推荐答案:123回复于2022/06/12
不会出现,含有双歧杆菌和乳杆菌时,使用MRS培养基对样品进行倾注后厌氧培养,即可得出两种乳酸菌的总数;而如果还想知道里面所含双歧杆菌的数目,则需要同时用改良MRS进行倾注计数,改良MRS上长出的菌落数,即为双歧杆菌的数目。
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mingxiaoyan
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不会出现负数的,因为乳酸菌总数是乳杆菌、双歧杆菌和嗜热链球菌的总和。
wuyuzegang
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不会出现负数,详细可以参考标准解读http://www.hopebiol.com/asphtml/refere10580.htm

1、单一菌种的情况

  (1)只有双歧杆菌时,使用MRS培养基或者双歧杆菌琼脂倾注、培养、计数;

  (2)只有乳杆菌时,使用MRS培养基进行培养计数;

  (3)只有嗜热链球菌时,使用MC培养基进行培养计数。此处需要说明一下,嗜热链球菌在MRS上也能生长良好(如图1),所以当只有这种单一菌种存在时,日常工作中,如果不需要完全按照国标要求,是否可以使用MRS培养基进行培养计数。

综合比较,当只有单一菌种存在的情况下,如果不需要严格按照国标要求来操作,只需要将样品稀释后,取合适浓度用MRS培养基进行倾注计数即可。MRS可以作为通用培养基使用。

2、两种菌的情况

  如果样品中有两种菌存在,除了要检验出乳酸菌的总数外,有时还需要对其中各个菌种的数目进行统计。

  (1)含有双歧杆菌和乳杆菌时,使用MRS培养基对样品进行倾注后厌氧培养,即可得出两种乳酸菌的总数;而如果还想知道里面所含双歧杆菌的数目,则需要同时用改良MRS进行倾注计数,改良MRS上长出的菌落数,即为双歧杆菌的数目。

  (2)含有双歧杆菌和嗜热链球菌时,标准中使用改良MRS和MC进行倾注计数,分别得出双歧杆菌和嗜热链球菌的数目,两者加在一起即为菌落总数。采用改良MRS对双歧杆菌进行计数,这个没有争议,因为在改良MRS琼脂中,只有双歧杆菌能生长,嗜热链球菌不能生长。

  在MC琼脂上,虽然在厌氧条件下,嗜热链球菌和双歧杆菌都能生长(如图2),但本标准中要求需氧培养,所以此时MC琼脂上长出的就只有嗜热链球菌了。这个方法是可以达到计数嗜热链球菌的目的的。

所以,要想从同一种培养基上,明显地区分出两种菌来,分别计数,确实也不容易。

  问题的关键在于,标准中明确规定,将两种培养基上培养出的菌数,进行相加,即得乳酸菌总数。通过上面的分析,我们不难得出,这样处理,得出的结果实际上是把乳酸菌总数翻倍了,即乳杆菌和嗜热链球菌的数目分别重复了两遍,并且也不能明确得出每种乳酸菌的具体数目。

  综合以上三种情况,我们可以总结为,在不需要严格按照标准操作的前提下,如果已知样品中有两种乳酸菌,要检验样品中的乳酸菌总数,只要用MRS进行倾注就可以了,平板上长出的菌数即为乳酸菌总数;而要确切地知道其中某一种菌的数目,则要根据情况进行培养基的选择:使用改良MRS可以很容易得出双歧杆菌的数目,使用MC可以勉强计出嗜热链球菌的数目,但要注意避免其他菌种的干扰;对于乳杆菌的数目,只要用菌落总数减去已经计出的另一种菌的数目即可。

3、三种菌的情况

  标准中规定,用MC需氧培养,得出嗜热链球菌的数目;MRS厌氧培养,得出乳酸菌和双歧杆菌的总数,最后将两者加和,即为乳酸菌总数;如果要单独检验双歧杆菌的数目,则采用改良MRS琼脂进行厌氧培养后计数可得。

  这里同样存在上面所述的问题。

  对于标准中为什么这么写,我们可以理解成,它默认了在MRS琼脂上嗜热链球菌不会生长,而在MC琼脂上乳杆菌不会生长?但这明显是与我们实际操作情况不相符的。

  如果按照这种要求进行计数,最终所得的数目,将会把乳杆菌和嗜热链球菌重复计数。

  在日常工作中,如果不需要严格按照国标操作,要解决这一问题,我们还是借助这两种培养基,只要将MRS上长出的所有菌落数出来,即为样品中的菌落总数。而如果非要追究里面所含嗜热链球菌的数目,只能借助MC琼脂,计数时要仔细甄别,不要误将乳杆菌计成了嗜热链球菌,从而导致结果误差;最后用菌落总数减去嗜热链球菌的数目,即为乳杆菌的数目。
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2022/6/12 11:23:57 Last edit by dahua1981
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不会出现,含有双歧杆菌和乳杆菌时,使用MRS培养基对样品进行倾注后厌氧培养,即可得出两种乳酸菌的总数;而如果还想知道里面所含双歧杆菌的数目,则需要同时用改良MRS进行倾注计数,改良MRS上长出的菌落数,即为双歧杆菌的数目。
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