做
GC-MS 前处理,流程如下
“
将样品(每个样品30 mg)转移到1.5 mL Eppendorf试管中,向每个样品中加入两个直径为4mm的钢球(Easybio,中国北京)、20μL内标物(甲醇中的2-氯-1-苯丙氨酸,0.3mg/mL)和600μL提取溶剂甲醇:水(4:1,v/v)。样品在?80°C下储存2分钟,并在60 Hz下超声处理2分钟。向每个样品中加入120μL氯仿,并剧烈涡旋样品,然后在环境温度下超声辅助提取10分钟,并在4°C下储存10分钟。样品在4°C下以13310 g离心10分钟。通过将所有样品组的等分试样合并以产生合并样品来制备质量控制(QC)样品。将500μL上清液的等分试样转移到玻璃取样小瓶中,在室温下进行真空干燥。随后加入80μL甲氧基胺盐酸盐(溶于吡啶中,15mg/mL)。将所得混合物剧烈涡旋2分钟,并在37°C下孵育90分钟。向混合物中加入80μL N,O-双三氟乙酰胺BSTFA(含1%三甲基氯硅烷(TMCS))和20μL正己烷,剧烈涡旋2分钟,然后在70°C下衍生60分钟。在GC–MS分析之前,将样品在环境温度下放置30分钟。”
其中的氯仿买不到,需要备案什么的,想问问做过的大佬们,可以用别的试剂代替氯仿吗?