1、点样量确定及专属性

对照品溶液制备：取芍药苷对照品约2mg，精密称定，置2ml量瓶中，加乙醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得。

供试品溶液制备：取本品约2g，研细，精密称定，置具塞锥形瓶中，加乙醇10ml，振摇5分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇1ml使溶解，作为供试品溶液。

阴性样品制备：

白芍阴性样品制备：旋覆花6g，桔梗6g，前胡6g，荆芥穗5g，防风5g，紫菀10g，百部6g，姜半夏6g，陈皮5g，当归6g，党参8g，甘草5g，加水浸泡30min，煎煮三次，每次1小时，滤液浓缩至适量，蒸干，即得。

阴性样品溶液制备：取白芍阴性样品约1g，研细，精密称定，置具塞锥形瓶中，加乙醇10ml，振摇5分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇1ml使溶解，作为阴性样品溶液。
结论：供试品点样量为20μL时，斑点清晰，与对照品相当，因此，确定供试品点样量为20μL。

照薄层色谱法（《中国药典》2020年版通则 0502）试验，吸取供试品溶液10μl、20μl、对照品溶液10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-乙酸5%香草醛硫酸溶液，加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的蓝紫色斑点。乙酯-甲醇-甲酸（40:5:10:0.2）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%香草醛硫酸溶液，加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的蓝紫色斑点。

结论：供试品点样量为20μL时，斑点清晰，与对照品相当，因此，确定供试品点样量为20μL。

阴性样品色谱中，在与对照品色谱及供试品色谱相应的位置上，阴性无干扰，本方法专属性良好。

2、耐用性

分别考察不同厂家薄层板、不同温度、不同湿度的耐用性。

溶液配制

对照品溶液使用：使用“1”项下所配。

供试品溶液使用：使用“1”项下所配。

按照3.1确定的点样量，分别取上述溶液，点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸（40:5:10:0.2）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%香草醛硫酸溶液，加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的蓝紫色斑点。

（1）不同厂家薄层板

分别将上述溶液点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸（40:5:10:0.2）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%香草醛硫酸溶液，加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的蓝紫色斑点。以确定薄层板厂家变更时方法的可行性和适用性。

（2）不同温度下展开

分别将上述溶液点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸（40:5:10:0.2）为展开剂，分别于不同温度下（4℃冰箱、40℃电热恒温干燥箱）展开，取出，晾干，喷以5%香草醛硫酸溶液，加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的蓝紫色斑点。以确定方法展开温度变化时的适用性。

（3）不同湿度下展开

分别将上述溶液点于同一硅胶GF₂₅₄薄层板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸（40:5:10:0.2）为展开剂，分别于不同湿度下（25%、75%）展开，取出，晾干，喷以5%香草醛硫酸溶液，加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的蓝紫色斑点。以确定方法展开湿度变化时的可行性和适用性。

结论：该方法不同厂家薄层板、不同温度、不同湿度的耐用性良好。

3、中间精密度
溶液配制：
对照品溶液制备：同.1。
供试品溶液制备：同1。
不同的人员于不同日期进行试验，按照3.1确定的点样量，分别取上述溶液点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸（40:5:10:0.2）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%香草醛硫酸溶液，加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的蓝紫色斑点。以确定方法人员变化时方法的适用性。