主题:【第十七届原创】【金秋计划】中药颗粒剂中甘草鉴别方法验证

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中药颗粒剂中甘草鉴别方法验证

1、专属性

1)溶液配制

对照药材溶液:甘草对照药材约1g精密称定置具塞锥形瓶中,加乙醚40ml,加热回流1小时,滤过,弃去醚液,药渣加甲醇30ml,加热回流1小时,滤过,滤过蒸干,残渣加水40ml使溶解,用正丁醇提取3次,每次20ml,合并正丁醇液,用水洗涤3次,弃去水液,正丁醇液蒸干,残渣加甲醇5ml使溶解,作为对照药材溶液。

对照品溶液:取甘草酸单铵盐对照品约2mg,精密称定,置1ml量瓶中,加甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀,即得。

供试品溶液:取本品约5g,研细,精密称定,置具塞锥形瓶中,加乙醚40ml,加热回流1小时,滤过,弃去醚液,药渣加甲醇30ml,加热回流1小时,滤过,滤过蒸干,残渣加水40ml使溶解,用正丁醇提取3次,每次20ml,合并正丁醇液,用水洗涤3次,弃去水液,正丁醇液蒸干,残渣加甲醇5ml使溶解,作为供试品溶液。

阴性供试品溶液:取甘草阴性供试品约2.5g,研细,精密称定,置具塞锥形瓶中,加乙醚40ml,加热回流1小时,滤过,弃去醚液,药渣加甲醇30ml,加热回流1小时,滤过,滤过蒸干,残渣加水40ml使溶解,用正丁醇提取3次,每次20ml,合并正丁醇液,用水洗涤3次,弃去水液,正丁醇液蒸干,残渣加甲醇5ml使溶解,作为阴性供试品溶液。

表1 称样量

/

对照品(mg

对照药材(g

供试品g

阴性样品g

称样量

2.255

1.0068

5.0031

2.5025

 

2展开剂的配制及使用

乙酸乙酯-甲酸-冰醋酸-水(15:1:1:2为展开剂,置展开缸中预饱和。

3)点样量

供试品溶液5μl、阴性供试品溶液5μl、对照药材溶液2μl对照品溶液2μl

4检视

乙酸乙酯-甲酸-冰醋酸-水(15:1:1:2)的展开剂中展开,取出,晾干,喷以10%硫酸乙醇溶液,在105℃加热至斑点显色清晰,置紫外光灯(365nm)下检视

(5)结果:

阴性供试品色谱中,在与对照药材色谱对照品色谱相应的位置上,阴性无干扰

试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的荧光斑点;在与对照品色谱相应的位置上,显相同的橙黄色荧光斑点说明该薄层鉴别方法专属性良好。

2、中间精密度

不同检验人员于不同日期做薄层鉴别实验,对其试验结果进行评估。

(1)溶液配制

对照药材溶液对照品溶液、供试品溶液配制同专属性”项下。

        表2 称样量

/

对照品(mg

对照药材g

供试g

称样量

2.033

1.0067

5.0034



2展开剂的配制及使用

配制同专属性”项下。

3)点样量

供试品溶液5μl、对照药材溶液2μl对照品溶液2μl

4检视

乙酸乙酯-甲酸-冰醋酸-水(15:1:1:2)的展开剂中展开,取出,晾干,喷以10%硫酸乙醇溶液,在105℃加热至斑点显色清晰,置紫外光灯(365nm)下检视

(5)结果报告




6结论

更换不同人员、不同日期进行试验,试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的荧光斑点;在与对照品色谱相应的位置上,显相同的橙黄色荧光斑点。

说明该薄层鉴别方法中间精密度良好。

3 、耐用性

通过色谱方法的微小变动来考察方法的耐用性。(如遇条件不适,可适当调整变动条件)

    表3 耐用性试验条件

色谱条件

规定值

变化范围

温度(

室温

440

湿度(%

45%

25%75%

薄层板

硅胶G

硅胶G(不同厂家)



1)溶液配制

对照药材溶液对照品溶液、供试品溶液专属性项下。

2)展开剂的配制及使用

5.3.1专属性项下。

3)点样量

供试品溶液5μl、对照药材溶液2μl对照品溶液2μl

4检视

乙酸乙酯-甲酸-冰醋酸-水(15:1:1:2)的展开剂中展开,取出,晾干,喷以10%硫酸乙醇溶液,在105℃加热至斑点显色清晰,置紫外光灯(365nm)下检视

5结果报告




.



(6)结论

1%氢氧化钠硅胶G薄层板更换为不同厂家1%氢氧化钠硅胶G薄层板试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的荧光斑点;在与对照品色谱相应的位置上,显相同的橙黄色荧光斑点。

在不同温度、不同湿度条件下,试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的荧光斑点;在与对照品色谱相应的位置上,显相同的橙黄色荧光斑点。

说明该薄层鉴别方法在同厂家不同批号的薄层板、不同温度、不同湿度条件下耐用性良好。
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