主题:【分享】【金秋计划】+用离子交换柱做方法开发的时候,用乙腈和水作为流动相,在调整梯度的时候发现,刚开始用60%乙腈,RT为2.5分钟,调到40%乙腈,RT没有变化,30%也没有变化,一直调到20%的时候,RT突然变到了约13分钟,请问这是什么原因?

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答:离子交换柱的保留机理主要是静电相互作用力,影响因素主要有离子强度和pH,此外还有氢键等次级作用力,甚至分子排阻作用也可能存在,因而离子交换色谱中,保留机理并非像反相色谱那样简单,更不是单纯的跟有机相的比例呈正相关,需要考虑是否水相比例增大导致了流动相离子强度的改变,或增大了氢键作用力等。此外,离子交换色谱柱的基质是硅胶还是聚合物也有不同的影响。
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