主题:【求助】有关荧光内滤效应的问题

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ppttmmyy
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做荧光实验时,浓度太大了要考虑荧光内滤效应,哪怎么确定浓度设置多少就不用考虑内滤效应呢?
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JOE HUI
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楼主,确定在何种浓度设置下不用考虑荧光内滤效应,并没有一个固定的标准浓度,因为这与具体的物质性质有关。

一般的做法是配制几个浓度梯度的溶液,例如跨度为 100 或 1000 倍,设置 5-7 个浓度点,然后进行荧光实验。出现内滤效应的通常是高浓度点,其表现为浓度增大时,荧光强度不成比例上升,甚至降低。

通过这种方式,可以找到在特定实验条件下,对于所研究的物质而言,不会产生明显内滤效应的浓度范围。在实际操作中,建议多参考相关文献,了解类似物质的研究情况,以便更合理地设置浓度梯度进行实验探索。

123
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在荧光实验中,内滤效应是由于样品中高浓度的荧光物质吸收激发光和发射光而导致的荧光强度减弱现象。为了避免内滤效应的影响,通常需要在测量之前评估样品的吸收光谱,并确保样品在激发波长下的光密度(OD)小于0.1。当OD值小于0.1时,内滤效应通常可以忽略不计。
oscar_2007
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1.内滤效应是高浓度样品的荧光物质吸收激发光和发射光导致的荧光强度减弱现象。
2.无法确定浓度多少不考虑内滤效应,但可以避免其影响,就是测试之前评估样品的吸收光谱。
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