主题：【资料】部分GC，LC MS 色谱疑难解答

$$lc 色谱疑难解答
•    色谱图上的峰有拖尾现象。如何改善峰形？
可能的原因：
1. 系统内的死体积大
2. 样品在色谱柱上有吸附
3. 色谱柱适用时间很长
解决方法
1. 尽量减少流动相管线的死体积，确保管线接头的连接合适减小死体积，由于不同生产厂家的管线的接头和密封垫圈有可能不一样，尽量使用配套的管线接头和密封垫圈。
2. 使用洗脱更强的流动相
3. 更换新色谱柱
•    如何排除流动相中的气泡？如何排出流动池中的气泡？
避免流动相中产生气泡的最佳方式是将流动相经脱气装置进行脱气。如果没有脱气装置，则可以在流动相溶剂瓶中通入氦气进行脱气。也可以在检测器的出口端加一根细管线以调节流动池中的背压，但必须注意不要超过流动池的最大压力，否则会造成流动池漏液或流动池损坏。
如果流动池中出现气泡，则先摘下色谱柱，用一根管线直接将流动相接入检测器的入口。将异丙醇以较大的流速注入流动池。 直到基线上看不到毛刺为止。气泡就应该清除掉了。
•    如何减少基线噪音？
无规律噪音可能与污染有关。请冲洗色谱柱，对样品做合适的前处理以避免污染，并使用 HP$$lc 级别的溶剂。
连续噪音有可能由检测器或泵造成。要确定问题是否发生在检测器还是在泵，请先关泵停掉流量，监测基线。如果此时基线平稳，则噪音可能与泵有关系。使用 ChemStation 在线诊断或 $$lc 手持控制器检查泵方面的故障。如果停泵后噪音继续存在，则说明噪音与检测器有关。
•    色谱图上出现鬼峰。如何消除？
可能的原因：
1. 上次进样遗留组分产生
2. 有污染
3. 有气泡
4. 色谱柱问题
5. 保护柱失效
解决方法
1. 做样品后应保证有足够时间冲洗色谱柱,。有必要的话在运行结束后使用更强溶剂冲洗色谱柱。
2. 洗脱原色谱柱中的原有污染。
3. 为确保系统中没有气泡，只使用彻底脱气后的溶剂。
4. 更换色谱柱。
5. 更换保护柱。
6. 检查流动相纯度。
7. 检查样品中的其他成分
•    什么原因导致基线毛刺？
这很有可能是流动池内有气泡。请先停泵来进行确认,如果毛剌消失，则很有可能是由于流动池内有气泡。需要冲洗流动池。如果毛剌仍然存在，则需检查检测器本身的电噪音有关。

•    什么原因导致基线波动？
基线波动有可能与实验室的温度及湿度变化有关系。需确保室温及湿度稳定，将仪器从通风橱中取出，并将色谱柱和毛细管进行隔热保温

•    如何选择液相色谱保护柱？
保护柱的作用是用来防止分析柱被一些微粒物质堵塞,及在色谱柱上强吸附组分在色谱柱上吸附。为防止样品的杂质不进入色谱分析柱,不出现不必要的峰展宽，保护柱与分析柱的体积比应在 1:15 至 1:25 之间。
在理想的情况下，保护柱的填料应与分析柱相同，以确保得到分析柱较好的色谱图。尽量使保护柱与分析柱近似。在我们的目录里，将分析柱和与其配套的保护柱列在一起。
•    $$lc的灯强度测试失败，我该如何办?
强度测试是内置的UV/Vis检测器诊断测试功能. 它用来测试光学系统在全范围的性能. 安捷伦化学工作站测试检测器在不同范围的光谱强度，并与每个范围设定的极限值比较，给出每个范围 Pass（通过） / Fail (失败)的状态报告.
这一测试失败的原因有
1.灯旧了
2.流通池中有吸光的溶剂/空气泡
3.流通池脏了 / 或被污染了
4.污染的光学窗口 / 透镜等.
要解决这些问题，在流通池中充满水进行测试 / 允许检测器有足够的时间稳定. 检查灯的工作小时数，如果寿命已到就更换之. 用乙醇和无麻布清洗光学窗口.

MS
•    在 $$lc/MSD 操作中需要多大的氮气流量？
虽然优化值会因系统的不同而略有差别，并且取决于流动相的成分，但是在随附文档的表中给出不同 $$lc 流速下的典型雾化压力、干燥气体的流量和温度
While the optimal values will vary slightly from system to system and will
depend on the mobile phase composition, the following tables give typical
nebulizer pressure, drying gas flows and temperatures for various $$lc flow
rates:
ELECTROSPRAY
$$lc Flow Nebulizer Gas Flow Gas Temp
50-200μL 15-20 psi 7-10 L/min 350°C
200-400μL 20-30 psi 10-13 L/min 350°C
400-600μL 30-45 psi 13 L/min 350°C
600-1000μL 45-60 psi 13 L/min 350°C
APCI
$$lc Flow Nebulizer Gas Flow Gas Temp Vaporizer
100-400μL 60 psi 4 L/min 350° C 350°C
400-600μL 60 psi 4 L/min 350° C 375°C
600-1000μL 60 psi 4 L/min 350° C 425°C
1000-1500μL 60 psi 4 L/min 350° C 475°C
For either mode, the nebulizer uses approximately 0.7 to 1.2 L/min at 20
psi and 2 to 2.5 L/min at 60 psi.
Gas Consumption Per Hour
Mode $$lc Flow Gas Consumption
API-ES 50-400 L/min 462-822 L/hr
400-1000 L/min 822-852 L/hr
APCI 100-1500 L/min 360-390 L/hr
Standby N/A 222-252 L/hr
•    如果 MSD 离子光学系统测试报告“四极杆 DC 故障”，我该担心吗？
使用 $$lc/MSD ChemStation 软件 A.05.02/.04 版，在 MSD 离子光学系统测试中，当测试进行到“在极大（负）处”部分时，在诊断中常常会出现“离子光学系统电路工作困难... 四极杆 DC 故障”。这是测试本身的问题，所以不要因这个特殊的测试失败而排除仪器的故障。
•    $$lc/MSD 的待用条件是什么？
$$lc/MSD 的待用条件是：
    干燥气体流量为 3 L/min。
    雾化器压力 为 20 psi。
    干燥气体温度为 300º C。
    四极杆温度保持在 100º C。
    如果装有 APCI 源 , 则汽化温度保持在 325º C。
将干燥气体流量设定为 3 L/min 以保持喷雾室中氮气为正压，并且还因为低于此值就不容易调节流量。 流速低于 3 L/min 时，流量控制模块可能会因超时错误而关机。这样会导致 $$lc 发生“关机”错误并损失气体。 将雾化器压力设定为 20 psi 以保持针尖的清洁。
•    采用$$lc-MS/MSW我应当避免使用什么盐或组分?
所有 "ionic detergents （离子洗涤剂）" 都可能带来问题，以及高含量的 盐, 咪唑, 吐温, Triton-X, 还有高含量的 甘油.
对于所有样品溶液, 强烈建议 您在进样前检查缓冲液的兼容性.
•    如何提高所有分析物的灵敏度？
如果 MSD 调整正确而所有分析物的灵敏度都比较低，则这通常是由于 gc 或样品制备问题，而不是 MSD 本身的问题。通常需要查看进样器、进样口中 gc 色谱柱的位置、gc 与 MSD 之间的传输线及样品萃取和浓缩的方法。可以使用一种新的标准溶液作为故障排除工具
•    哪些色谱柱和流速可以满足 MSD 的正确操作？
根据 MSD 的型号和泵系统的不同，允许的流速范围也不同。5970 型号的流速限制在 1.0，5971 和 5972 型号为 1.5，5973 扩散泵型号为 2.0，5973 涡轮泵为 4ml/min。可以安装到传输线的色谱柱最大内径 (I.D.) 为 0.53mm。
•    如何排除故障：扩散泵温度过高或过低？
此故障有三种可能的原因。
A. 扩散泵油装载量不合适，油加得太多将导致泵冷却，加得太少将导致泵过热。放空系统，并按照硬件手册中推荐的体积来检查液面。
B. 扩散泵冷却扇没以正确的速度工作，或正对着一堵墙限制了空气的流通。将手放到扩散泵后面，检查从 MSD 排出的是不是热风。
C. 泵上的过冷过热温度开关故障。可以参考硬件手册的故障排除部分检查这个问题。如果一个或两个开关都坏了，则扩散泵电缆需要更换。在硬件手册的零件部分找到仪器型号的电缆信息。要更换电缆，需要使用安捷伦科技公司部件号为 # 8710-0614 的工具。仪器自带的工具包中没有这个工具。
•    清洗离子源之后, 我突然发现没有色谱图基线了，为什么?
如果问题在离子源清洗后发生,原因可能是脏的离子源引起的高放大器电压所致, 当安装了干净的离子源后进行质谱初始调谐和扫描时，可以引起过高的信号.
要解决这一问题, 就在[MAUAL TUNE]（手动调谐）中降低放大器电压到接近 1000 V的水平，并保存这一数值在 ATUNE.U 调谐文件和重新调谐质谱的 “[TUNE PARAMETERS（调谐参数）]”中.

不错啊,真是太谢谢了!