主题：【求助】急求液相的整套学习过程

活到九十 学到一百回复于2008/02/02

还有一个方法，你在论坛里搜索一下，看看有没有本地的版友，可以现场给你指点一下

无名回复于2008/02/02

1、清除泵内的空气，请问对泵内的脱气处理时如何进行的？
答:流动相充满泵体空间,不存在脱气的问题;为了减少流动相中可溶气体的影响,一般加在线脱气装置,对于单元系统,一般推荐流动相临用前微孔过滤脱气.

2、液相的色谱柱反相是什么意思啊？
答:
反相键合相色谱法
典型的反相键合色谱法是用非极性固定相和极性流动相组成的色谱体系。固定相，常用十八烷基（ODS或C）键合相；流动相常用甲醇-水或乙腈-水。非典型反相色谱系统，用弱极性或中等极性的键合相和极性大于固定相的流动相组成。
(1) 分离机制 反相键合相表面具有非极性烷基官能团，及未被取代的硅醇基。硅醇基具有吸附性能，剩余硅醇基的多寡，视覆盖率而定。简要介绍疏溶剂理论。
疏溶剂理论：当一个非极性溶质或溶质分子中的非极性部分与极性溶剂相接触时，相互产生斥力，自由能（G）增加，熵减小，不稳定性增加。根据热力学第二定律，系统由不稳定到稳定是自发的，即熵增加是自发的。因此，为了弥补熵的损失，溶质分子中非极性部分结构的取向，将导致在极性溶剂中形成一个“容腔”，这种效应称为疏溶剂或疏水效应。该理论认为，在键合相反相色谱法中溶质的保留主要不是由于溶质分子与键合相间的色散力，而是溶质分子与极性溶剂分子间的排斥力，促使溶质分子与键合相的烃基发生疏水缔合，且缔合反应是可逆的。容量因子k与自由能变化△G的关系如下式：
lnk＝lnV/V－△G/RT (8·5)
上式中的R为理想气体常数、T为热力学温度、V是色谱柱中键合相表面所键合的官能团的体积，V是色谱柱中流动相的体积。该式说明△G越大，被分离组分的k越小，保留时间越短。
(2)★★流动相的极性与容量因子的关系 流动相的极性增大，洗脱能力降低，溶质的k增大，t增大；反之,k与t减小。分离结构相近的组分时，极性大的组分先出柱。
(3) 特点 反相色谱法是应用最广的色谱法，主要用于分离非极性至中等极性的各类分子型化合物，因为键合相表面的官能团不流失，溶剂的极性可以在很大范围内调整，因此应用范围很宽。由它派生的反相离子对色谱法与离子抑制色谱法，可以分离有机酸、碱、盐等离子型化合物。用反相液相色谱法，可以解决80%左右的液相色谱课题。因此，必须给予反相色谱法足够的重视。对于结构异构体等难分离物质的分离，则应选用吸附色谱法。

3、流动相由几个组成部分，是蒸馏水和HPLC专用甲醇两个吗？或者有更多的？答:蒸馏水和甲醇只是通常的流动相组成,其他很多液体都可能被用到,典型的有机流动相组分如甲醇/乙腈/四氢呋喃等很多种,借用层析中的定义:
层吸液主要由对物质有不同溶解能力的两种或几种液体组成，通过固相支持物对层吸液中不同液体吸附能力不同，用于分离物质的液体。

4、大家给我一个整套的详细的HPLC操作，理论图文并茂的资料.
答:这个问题其实版面有很多的答案,最简单的推荐wufeng论坛的wsy18提供的资料
http://www.instrument.com.cn/bbs/forum_500.htm
那里有许多flash的教学材料

sun-sd回复于2008/02/02

看你仪器的配置：等度仪器每次用一个，如果是梯度，几元梯度就同时用几个。

eleven22811回复于2008/02/02

http://www.xauat.edu.cn/ex/tsinghua/software/08/09/001/01/00001/8_ye/8_1_01.htm

很理论的资料，而且讲的不错。