六、 快速的细菌对抗菌药物的敏感性试验。Rapid susceptibility tests of bacteria to anti-microbiol drugs.
当前,检测细菌对抗菌药物的敏感性试验需用NCCLS推荐的方法与标准。新的检测手段,如分子生物学手段检测细菌的耐药基因,自动化的药敏试验仪器,E test法等可提高准确性与效率,但也难以实现快速。
快速纸片法(Nitrocefin)检查β内酰胺酶,对革兰阳性球菌,淋病奈瑟菌,流感嗜血杆菌,卡他莫拉菌有重要意义。
快速鉴定MRSA和MRCNS的快速乳胶凝集试验(日本生研公司)可检出变异的青霉素结合蛋白(PBP2a)经与mecA基因检测比较,其敏感性98.5%,特异性达100%。 快速结核分枝杆菌药敏试验。BBL公司的MGIT(Mcobacterinm Growth Inhibitor Tube)于结核杆菌TH9培基中加入异菸肼,利福平等药物及荧光指示剂。荧光在有氧时淬灭,如细菌存活进行代谢而耗氧又复发荧光。在365nm的紫外灯下观察有无荧光而判定敏感或耐药,试验仅需4-5h.Jacobs等将荧虫酶的基因导入结核杆菌的噬菌体,噬菌体只侵入活的结核杆菌而发出荧光。将菌体与一定浓度药物作用后,如菌体存活则感染噬菌体,可在荧光显微镜下观察到荧光,即为耐药;无荧光者为敏感菌。
细菌代谢指示剂的应用。应用氧化还原指示剂,可指示存活细菌的代谢活动,其颜色的改变可由敏感的光度计测定,使检测时间明显缩短。已应用的指示剂TTC(氯化三苯四氮唑)MTT(3-(4,5 dimethylthiazol-2yl)-2,5 diphenyltetrazolium bromide),后者优于前者。最新的敏感指示剂是Alamar blue,现已应用于革兰阴性杆菌,阳性球菌,酵母样菌,丝状真菌以及结核杆菌的MIC,对多数细菌4-6h即可判读结果。
细菌对抗菌药物的敏感性反映一定的耐药机制,对正确鉴定细菌也有重要价值。