Sepharose 4B 的活化 - 氯代环氧丙烷活化. 可用下面两种溶剂。
(1) 二氧六环
取10ml 沉淀体积的Sepharose 4B于G2玻璃烧结漏斗中,抽滤成半干,先用约100 ml. 0.5mol/L NaCl 溶液淋洗,再用100~150ml蒸馏水洗涤,以除去其中的保护剂和防腐剂。抽干约得6克半干滤并,置于50ml三角瓶中,加入6.5 ml 2mol/L NaOH,2ml氯代环氧丙烷及15ml 56%二氧六环,并置于40℃温和搅拌2小时,然后将胶转移到G2玻璃漏斗中以蒸馏水淋洗除去多余的试剂,最后再用约100ml 0.2mol/L Na2CO3 pH = 9.5缓冲液洗涤。接着尽快进行偶联实验。
(2)二甲基亚砜
同(1)法将6克半干滤并置于50ml三角瓶中,加入6.5 ml 2mol/L NaOH,2 ml氯代环氧丙烷及15ml 56%二甲基亚砜,充分混匀,在40℃ 振荡2小时,然后同(1)法洗涤凝胶后尽快进行偶联。 不知道是否符合你的要求