主题:【求助】关于液相梯度

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chenaroy
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各位大虾们,我用的是Agilent1100,做外包服务,化合物纯度在95%以上就可以交差了,以前直接看化合物的性质选择流动相,比如,如果化合物带酸根的我就选择带酸性流动相,后来觉得这样找条件太费时间了,而且有些化合物看不出酸碱性,就试试梯度走,我走的样品是酸性的,就用ACN:0.1%甲酸(梯度如下),后来对照时间,感觉主峰是100%乙腈冲出来的,而且杂质也多,基线也不平,后选择ACN:0.1%甲酸(70:30)重新走样也把主峰给走出来了,不过杂质没先前的多。请问梯度的主要用途以及怎样的设置法?
时间      ACN      0.1%甲酸 
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有水有渝
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把色谱柱冲洗干净,之前用100%冲出来的也可能是以前残留在色谱中的污染物。能用等度的,一般不建议使用梯度。梯度的用途主要是保证分离度的前提下,缩短检测时间。
ifine
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时间      ACN      0.1%甲酸 
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chenaroy
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恩,我在之前做的时候已经冲干净柱子了,还是有小杂质,那梯度走样时会出现基线不平吗?请问大虾们梯度有哪些应用?仪器太少样太多,老板想节约时间,有相关的资料吗?谢谢!
有水有渝
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做一个梯度的空白看一下就知道色谱柱冲洗干净了没有。
梯度的主要作用已经说了,就是检测多组分样品时,既能达到分离度,又能较快的分析完全。想看梯度的资料,最好是去看一部药典,中药很多都用梯度洗脱,18种氨基酸也是不错的资料。
chenaroy
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