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主题：【讨论】高氯酸沉淀蛋白，对柱子影响多大？

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wangjuan55
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发表于：2010/06/24 10:21:01 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
现在做血样，看文献有用高氯酸沉淀蛋白的，一般用量很少，比如血样1ml，加70%高氯酸0.2ml，过滤直接进样100ul。这样对柱子危害大么？能不能直接进柱子？谢谢高手指点。
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2010/6/24 12:31:31 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
这个还要看你的色谱柱PH使用范围和流动相的缓冲能力，不知道有没有测过样品溶液的PH？
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wangjuan55
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2010/6/24 14:19:55 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 有水有渝(xky0230699) 发表:
这个还要看你的色谱柱PH使用范围和流动相的缓冲能力，不知道有没有测过样品溶液的PH？

我用的是迪马柱子，ph是1.5，用的流动相是甲醇，0.2%甲酸。样品溶液没测过，量太小了，ph纸测了一下是1左右，用ph计的话溶液根本不够用。我也就是无知者无畏，开始进过三次样。现在想想还是挺害怕、谢谢斑竹，真是辛苦啊。
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有水有渝
xky0230699
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2010/6/24 15:43:09 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
这个方法是自己建立的吗？
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1818
xyhdcm2002
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2010/6/24 16:20:27 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
如果PH太低了,柱子的使用寿命会很低的.
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wangjuan55
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2010/6/24 16:57:13 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 有水有渝(xky0230699) 发表:
这个方法是自己建立的吗？


看文献上有用这个方法的，所以就试了试。还是不用了。另寻他法吧。
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wangjuan55
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2010/6/24 16:57:49 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 xyhdcm2002(xyhdcm2002) 发表:
如果PH太低了,柱子的使用寿命会很低的.


嗯，谢谢、
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wangjuan55
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2010/6/24 17:04:39 9楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 有水有渝(xky0230699) 发表:
这个方法是自己建立的吗？

从理论的角度讲，这样对柱子损害大么？想想20ul的强酸性物质过了一遍柱子。。。。。。
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有水有渝
xky0230699
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2010/6/25 13:21:20 10楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
这个损害要经过验证才知道，也就是耐用性试验，进上几百针样品，看看色谱柱效，分离度，峰形，峰面积等有没有什么变化。
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sjw428
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2010/6/25 14:56:16 11楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
可以再把pH值调回来呀，沉淀离心，过后把pH调到中性
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wangjuan55
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2010/6/26 11:27:45 12楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 有水有渝(xky0230699) 发表:
这个损害要经过验证才知道，也就是耐用性试验，进上几百针样品，看看色谱柱效，分离度，峰形，峰面积等有没有什么变化。
呵呵，我敢拿这个做实验，弄坏了老板把我当老鼠放血了。
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