主题：【原创】CE基础知识系列（3）：各种电泳模式的应用

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nini2006

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发表于：2012/04/18 01:37:17 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

本活动分为5个系列，系列之间的关系或为递进关系或为并列关系。每周一个系列，形式不定，如为竞猜形式则以多对多得不对不得为原则，竞猜期一个星期，一星期后将公布答案，竞猜结束。

CE基础知识系列（3）：各种电泳模式的应用

由于各种原因导致本系列到现在才能跟大家见面，sorry N次方。
本期的基础知识将从电泳模式的选择角度来谈CE的应用，不设再设奖品（加分）。

毛细管电泳模式的选择，可以有不同的原则，比如简单性、目的性、普适性、选择性、样品的特异性等。

以简单性为原则时，所选分离模式的操作、条件优化、分离控制等必须是最简单和最容易的，而且富于后续变化。根据这已道理，首先应该考虑自由溶液分离模式，最后才考虑填充形式的分离模式（图1）。简单原则是毛细管电泳模式的一般规则。

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图1 CE分离模式选择流程

在分离生物样品时，通常需要根据分离的目的来选择分离模式：欲测定样品的尺寸，就须选择非胶筛分毛细管电泳（NGCE）或毛细管凝胶电泳（CGE），偶而可选用区带电泳（CZE）或胶束电动色谱（MEKC）；要测定样品的等电点的话则应选用毛细管等电聚焦电泳（CIEF）；在进行亲和作用研究时，则应首选亲和毛细管电泳（ACE）。

我们的分析目的可能并不是单一的，这时的分离模式选择，就应该注意考虑其通用性。CZE、MEKC和毛细管电色谱（CEC）的通用性和可调节性都较大，但根据简单性原则，还以CZE或MEKC为优。注意，填充型毛细管电泳不适用于颗粒样品的分离，甚至也不适用于大分子分离。

有时候，我们会特别注重分离的选择性，即只希望把目标组分分离出来。此时应优先考虑选择性高的分离模式，如ACE等。如果已知样品的某些特性，也可以根据此选择分离模式。比如在分离蛋白质和多肽等两性样品时，可以优先考虑CIEF；在分离中性分子时，优先考虑MEKC；在分离水难容组分时，优先考虑沸水毛细管电泳形式等。

总的来说，CZE最简单，最稳定，容易控制，适用性广。广泛用于药物、环境、农药、食品等领域中，实现醇、黄酮、喹啉、酚等有机化合物的分离。但是对于复杂组分，CZE常常会表现得无能为力。由此才衍生出了那么多种类的分离模式。但并不是说，某种类型的物质只能对应单一种分离模式。比如手性分离，CZE（使用添加剂如手性金属络合物、手性冠醚、环糊精及其衍生物等）、MEKC、CGE、CEC都可以实现。对蛋白质分析，一般选择NGCE，NGCE，ACE等。DNA碎片分离可以采用任何模式，而尺寸分离则使用CGE和NGCE。糖及其缀合物的分析首先需要解决电荷问题。一般采用络合法、强碱电离或衍生使其带电。电荷问题解决后基本CZE就可以将其分离。

本期内容大多总结自《毛细管电泳技术及应用》（陈义编著，化学工业出版社，2000年）

上期两期主题：

CE基础知识系列（1）：CE电泳模式

http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20120316/3926304/

CE基础知识系列（2）：各种电泳模式的分离原理

http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20120327/3947187/

下期预告：
CE基础知识系列（4）：各种CE装置的介绍