主题：【第七届原创】【许愿原创】高效液相色谱还能更高效

高效液相色谱还能更高效

    随着科学技术的不断发展，分析仪器及分析方法的不断优化，降低实验成本、提高分析效率被越来越多的分析人员及分析相关人员所重视。其中提高工作效率现在很多人看好超高效分析技术，而忽略了高效液相色谱也能实现更高效的分析效果。提高分析效率最重要的体现就是缩短分析时间，这样可以减少人工费用和其它费用（比如减少流动相的使用，减少仪器的损耗，减少水电等的费用，减少实验室开放时间等），间接的降低了实验成本。下面我们就介绍下高效液相色谱更高效的体现缩短分析时间的好处及实现方式。

  首先我们先看一个实例，来具体看看缩短分析时间的种种好处吧。

在这个色谱条件下

色谱柱：Promosil C₁₈，4.6 X 250mm，5um色谱柱
S/N:P9510525CIL0835
流动相：甲醇（色谱纯）
检测波长：254nm
流速：1.0mL/min
进样量：20ul
柱温：室温

样品：萘/甲醇溶液（来自国家标准化物质中心的标准品，加甲醇稀释后的某一浓度）

色谱图：

    这样样品保留时间就减少了近一半，灵敏度提高了近一倍，色谱峰宽小了，色谱峰形也好了，优势还是很多的，具体大致有以下几种：

1.  缩短分析时间能有效的降低劳动力成本；

2.  缩短分析时间一般都会降低方法检出限，样品不足时还可以适当减小进样量以节省样品；

3.  缩短分析时间色谱峰宽小，峰形好；

4.  缩短分析时间能减小仪器的耗损，延长仪器的寿命；

5.  缩短分析时间能减小氘灯、色谱柱等耗材部件的耗损；

6.  缩短分析时间能减少流动相、清洗液等的用量，既降低成本又减小污染；

7.  缩短分析时间能降低实验室水电等费用；

8.  缩短分析时间能缩短实验室的开放时间。

    总之缩短分析时间益处很多，有时既能节省时间，减小分析成本，减小污染，又有利于提升分析效果，可谓是一举多得，值得提倡。

    下面介绍下高效液相色谱常用的几种缩短分析时间的方法：

1.  适当加大流速（流速在允许范围内）；

2.  对于某些对温度敏感的物质，在允许范围内适当升高温度（一般情况下在等度洗脱条件下比在梯度洗脱条件下效果更加明显）；

3.  流动相是有机相（包括甲醇、乙腈等）和水或缓冲盐的混合溶液时，适当增加有机相的比列（该方法适合大多数的反相色谱法）；

4.  换用短甚至或是内径细的色谱柱；

5.  选择更高效或是更合适的色谱柱；

6.  采用梯度洗脱方式；

7.  减小从进样阀出口到检测池入口连接管路的长度及死体积（这一条更有利于减小色谱峰由于样品在流动过程中扩散而变宽，峰形变差）；

8.  在离子对色谱法中就得适当增加流动相中离子对试剂的浓度；

9.  调节流动相的种类和比例，不如有的方法中选用甲醇水溶液作为流动相，改为甲醇乙腈水溶液效果可能会更好些。

    以上这些方法都是高效液相色谱常用的缩短分析时间的方法，但有些方法对所有分析物是通用的，效果很好，不如第1条、第2条、第4条、第5条、第7条等。有些方法就只能针对某些分析物有较好的效果，有局限性，比如第9条。其中以改变流动相，或换更理想的色谱柱，采用下控温（高于室温的温度）方法为主。色谱柱现在市场上以长度150mm或250mm，内径4.6mm，填充物粒径5um为主。

    上面这些方法除了第7种连接管路越短死体积越小越好外，其它的都是有要求的，有些实验方法是不能随意改变条件的。有些实验改变了一个或几个条件后分析时间是缩短了，但其它指标很可能就不理想了，如改变了方法第1、2、3、4、8、9条中的一条或几条时可能会导致多组分物质（包括干扰物）的分离度差，峰形不好等现象。

    缩短高效液相色谱分析时间有很多好处，但调整分析方法必须得满足三个前提：

1.  在实验方法允许范围内对方法进行调整；

2.  在仪器及配套设备允许的范围内对方法进行调整；

3.  在不影响分析结果与效果的前提下对方法调整调。

    现在分析方法要求最主要的就是简单、方便、准确（线性、重复性、分离度等指标得好）、高效。高效越高越好，无止境，其中缩短分析时间是高效最主要的体现，实现的方法也有很多种，具体的情况选具体的方法，需谨慎。

    高效液相色谱还能更高效。介绍不周、不准的地方还需大家积极补充、纠正，小弟会万分感激！