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液相色谱（LC）
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主题：【求助】新色谱柱用第三次出现对称的双峰

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Insm_b2998d82
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发表于：2018/06/09 10:44:38 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
大神们，帮帮忙，刚买的液相Waters色谱柱， 第一次样品出平头峰，第二次用出箭头峰，第三次出现对称的双峰，清洗仪器进样口峰形变丑，是色谱柱哪里污染了吗？仪器污染？还是样品浓度问题？清洗色谱柱第二天还是出现双峰啊，怎么办啊～
该帖子作者被版主 夏天的雪加 2积分， 2经验，加分理由：鼓励发帖
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2018/6/9 15:31:05 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
你的进样量不一样吗？检测的物质与色谱条件方便说明一下吗，压力有没有越来越高？
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支点
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2018/6/9 17:55:33 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
平头峰一般是检测器过载要减少进样量；双峰一般可能是二次进样也就是进样器或柱头脏了清洗一下，也有可能是样品溶液与流动相相差较大需要更换初始流动相做容积。
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dadgoh
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2018/6/10 17:14:58 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
降低样品浓度
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夏天的雪
bingwang228
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2018/6/11 8:48:34 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
平头峰，是浓度太大了，能否说一下您的待测物质是什么以及色谱条件
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Insm_b2998d82
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2018/6/11 10:23:22 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 支点(zhx_fs_ln) 发表:平头峰一般是检测器过载要减少进样量；双峰一般可能是二次进样也就是进样器或柱头脏了清洗一下，也有可能是样品溶液与流动相相差较大需要更换初始流动相做容积。
柱头脏了该怎么办呢？，应该是柱头脏了，样品溶于甲醇，可是分别用梯度10%，50％，90%的甲醇，冲洗洗了两天，出峰还是分叉了。
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2018/6/11 10:26:04 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 dadgoh(dadgoh) 发表:降低样品浓度
降低，连接主峰前面还是分叉了，分叉峰
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2018/6/11 10:28:56 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 有水有渝(xky0230699) 发表:你的进样量不一样吗？检测的物质与色谱条件方便说明一下吗，压力有没有越来越高？
检测物质，检测标准品对氨基苯酚，进样量不变，关键用旧色谱柱主峰就是出一个色谱峰
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Insm_b2998d82
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2018/6/11 10:32:38 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 夏天的雪(bingwang228) 发表:平头峰，是浓度太大了，能否说一下您的待测物质是什么以及色谱条件
同一根色谱柱，第一次用，检测标准品就是对氨基苯酚，然后第一次检测是平头峰，第二次检测就是很尖锐的峰了，就是上述第四张色谱图，第三次检测就是二三两张色谱图。
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ggxxdd2000
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2018/6/11 15:30:11 9楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
你这个现象是柱子过载或样品吸附，新柱子使用前是否达到柱平衡，用纯甲醇0.2流量长时间冲洗或把柱子口（进样口）端的过滤筛超声冲洗，还有样品浓度也降低吧
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hnteng
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2018/6/12 13:36:25 10楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
  样品浓度太浓了！这都顶天了！
  可以看出，你从来没接触过液相色谱，也没受到任何正规培训。这样不行啊。不能蒙头脑袋就上，这是精密仪器。

  先降低到原浓度的50到100分之一试试。
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2018/6/12 13:37:54 Last edit by hnteng
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