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GB/T18936禽流感抗体HI试验应进行4HAU标定和校正
GB/T18936-2003《高致病性禽流感诊断技术》发布15周年来一直未予修订,其中第3章“血凝(HA)和血凝抑制(HI)试验技术”规定:对抗原进行HA试验测定效价后,配制4HAU直接用于HI试验。
但在SN/T1182-2010《禽流感检疫技术规范》中,4HAU配制后却需要标定和校正:
“将25 μL含4个血凝单位(即4 HAU)的抗原用PBS做等量倍比稀释,使每孔(25μL)含有2 HAU、1 HAU、0.5 HAU和0.25 HAU,每孔补加25μL PBS,再加入1%鸡红细胞25μL,判定血凝结果与预期是否相符合。2 HAU、1 HAU孔红细胞应出现完全凝集,0.5 HAU孔红细胞应出现50%凝集,0.25 HAU孔红细胞应不凝集。若不相符,应重新配制抗原,测定效价。”
将上述文字列成图表如下,操作过程可更加直观:
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多年来,我们在对不同单位生产的多个批号抗原测定过程中,发现根据HA效价配制的4 HAU,与实际效价之间存在着一定的差距,最多时甚至相差1.5个滴度。如果不予以标定和校正,将导致抗体效价反方向相差1.5个滴度左右。
因此,建议GB/T18936修订时,将4HAU标定和校正的内容加入其中,使标准更显其科学性和合理性。