主题：【资料】国产大肠菌群快速测试片操作手册

大肠菌群操作方法大肠菌群快速测试片操作手册
一、    测试：
1、    未开封时，冷藏于≤8℃（≤46℉），并在保存期内用完，高温度时，凝固水可以排除，包装物最好于室温启开。
2、    已开封的，将封口以胶带封紧。并按说明书上进行存储。
3、    制备1：10和更大稀释的食物样品稀释液，称取或吸取食物样品，置入适宜的无菌容器内，如均质袋、稀释瓶、WhirlPak bag或者其他灭菌容器内。
4、    加入适量的无菌稀释液,包括Buffered peptone Buffer(IDF phopsphate buffer ,用0.0425g/L的KH2PO4调PH7.2) 、0.1%的蛋白胶水(ISO方法6887) 、缓冲蛋白胶水(ISO方法6579) 、盐溶液(0.85-0.90%)、bisulfite-free letheen broth或蒸馏水.
不可使用含有枸橼酸盐、酸性亚硫酸盐或硫代硫酸盐的缓冲液. 因为它们能抑止菌生长。
5、    搅拌或均质样品。
样品的稀释液调PH6.5－7.2（对酸性样品的稀释液用1 NaOH，对碱性样品用1mol/L的HCL调PH。
6、    将测试片置于平坦表面处，揭开上层膜。使用吸管将1mL样液垂直滴加在测试片的中央处。
7、    细心将上层膜缓慢盖下，避免有气光泡产生，切勿使上层膜直接落下。
8、    使用压板隆起面底朝下，放置在上层膜中央处。轻轻的压下，使样液均匀覆盖于圆形的培养面积上，切勿扭转压板。
9、    拿起压板，静置至少1分钟以使培养基凝固。
10、    测试片的透明面朝上，可堆叠至20片，对有一定湿度培养箱能保持最少份损失是需要的，并且可以节省空间。
11、    可目视及用标准菌落计数器或其它的照明放大镜计数，并可参考判读卡计算菌落数。
12、    可以分离菌落作进一步鉴定，即掀起上层膜，由培养胶上挑取单个菌落。
注：培养时间和温度因方法而有不同，最通用的认可方法是：
总大肠菌群
● AOAC官方方法986.33和989.10（乳/生乳和其它乳制品）
大肠菌群：32℃±1℃培养24±2h
●中国食品卫生微生物学检测标准（2003版）
大肠菌群：36℃±1℃培养24±2h
● AOAC官方方法991.14（食品类）
大肠菌群：35℃±1℃培养24±2h
● NMKL方法（147.1993）
大肠菌群：37℃±1℃培养24±2h
● AFNOR认可方法3M 01/2-09/89A和B（除水生贝壳类动物外的所有食品）
大肠菌群：30℃±1℃培养24±2h
耐热的（粪）大肠菌群
● AFNOR认可方法，3M 01/2-09/89C（所有食品） 44℃±1℃培养24±2h。当提高培养温度时，培养箱应有一定的湿度是需要的。
二, 测试大肠菌群的判读方法（附件续）