主题:【分享】食品微生物学检验 菌落总数测定 方法验证

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目的: 通过对食品中菌落总数测定方法进行验证,证明我公司采用标准GB 4789.2-2016《食品安全国家标准 食品微生物学检验 菌落总数测定》规定的方法对食品中菌落总数的测定满足检测要求。
1 实验室基本情况

表1-1参加验证的人员情况表

姓名

性别

职务

所学专业

从事相关分析工作年限

A

微生物主管

食品科学与工程

8年

B

微生物组长

食品科学与工程

5年


表1-2使用仪器情况登记表

仪器名称

仪器型号

制造厂商

备注

生化培养箱

SPX-250B-Z

上海博迅实业有限公司医疗设备厂

 

立式压力蒸汽灭菌器

YXQ-LS-75SⅡ

上海博迅实业有限公司医疗设备厂

 

净化工作台

SW-CJ-2D

苏州博莱尔净化设备有限公司

 

表1-3使用试剂登记表

试剂名称

批号

生厂商

备注

氯化钠

160913

西陇科学股份有限公司 

平板计数琼脂(PCA)

171223

北京陆桥技术股份有限公司 

2 方法验证过程
2.1 菌液制备:
挑取一粒大肠埃希氏菌(ATCC25922)瓷珠置于BHI液体培养基中,24h过夜培养,使之菌悬液浓度在109 CFU/mL,用无菌生理盐水按照10倍系列稀释法,稀释至10-6~10-7
2.2 样品制备:
2.2.1 试验组:取25 mL2.1中制备的菌液,加入到225 mL无菌盐水中,制成每毫升10 CFU~100 CFU的样品原液,作为试验组。
2.2.2 供试品组:不添加任何菌的相同样品。
2.3 培养基/试剂制备:
2.3.1按GB4789.28-2013食品微生物学检验 培养基和试剂的质量要求配制。
2.3.2根据供应商提供的配制说明进行配制。
2.4 实验操作:
2.4.1 接种及培养:选择3个稀释度的样品匀液,在进行10倍递增稀释时,每个稀释度分别吸取1 mL样品匀液于无菌平皿中,每个稀释度做两个平皿。同时,分别吸取1 mL空白稀释液加入两个无菌平皿内做空白对照。及时将15-20 mL冷却至46℃的PCA倾注平皿,并转动平皿使其混合均匀。待琼脂凝固后,36℃±1℃倒置培养48 h±2 h。为防止蔓延,可在琼脂凝固后在表面覆盖一层约4 mL的琼脂。
2.4.2验证试验采用空白对照、人员比对进行试验,并分别计算实验结果及人员比对结果。
2.5 测试数据:
 

人员

 

实验组别

 

稀释度

检测结果

平均结果

 

100

 

10-1

CFU/mL

CFU/mL

 

A

试验组-1

47

43

4

4

45

 

46

试验组-2

45

48

4

5

47

供试品组-1

0

0

0

0

<1

 

<1

供试品组-2

0

0

0

0

<1

 

B

试验组-1

38

45

4

4

42

 

41

试验组-2

43

35

4

4

39

供试品组-1

0

0

0

0

<1

 

<1

供试品组-2

0

0

0

0

<1


r(A)=log47—log45=0.02<0.25

r(B)=log42—log41=0.03<0.25



重复性:单人两次独立的单次实验结果的绝对差值,不应大于重复性限r=0.25,以10为底每g(或ml)中微生物计数的对数。

R=log46—log41=0.05<0.45



复现性:人员比对结果符合标准要求,两人单次试验结果的绝对差值,不应大于复现性限R=0.45,以10为底每g(或ml)中微生物计数的对数。
2.7是否对方法偏离?
□是    ■否
2.8 结论
根据GB 4789.2-2016 《食品安全国家标准 食品微生物学检验 菌落总数测定》要求依法检测,试验人员比对结果符合规定。

故我公司对食品中菌落总数的测定符合标准GB 4789.2-2016《食品安全国家标准食品微生物学检验菌落总数测定》的要求。
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原文由 irene红(v2846536) 发表:
请问大神,重复性和复现性的评价标准出自哪里?
ISO 4833
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