用
气质联用仪测红细胞膜脂肪酸,参考文献里有20种脂肪酸,我只测出了7种脂肪酸,是不是甲酯化方法不好?我用的甲酯化方法是:
取分离好的红细胞样本各50μL,依次加入已用BHT乙醇溶液抗氧化处理过的具塞玻璃试管中;
在具塞玻璃试管中加入400μL3N盐酸-甲醇溶液,充分混匀3分钟,然后放置于90℃烘箱中避光反应3小时,反应完毕后取出冷却至室温;
加入正己烷800μL到具塞玻璃试管中,充分混匀5分钟,4000rpm/min,2-8℃离心5min;
将离心后的上层正己烷溶液尽量完全转移至另一个1.5ml离心管中,室温环境下,用氮气吹干仪吹干;
在氮气吹干后的离心管中加入正己烷400μL溶解脂肪酸甲酯产物,充分混匀3分钟,然后转移100μL至样品瓶中,待测。