主题:【分享】化合物属性对色谱分离条件的影响

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lijing320323
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1、分子量大小

分子量大于3000的,采用凝胶色谱条件,或者离子交换色谱条件

分子量小于3000的,采用正相silica条件、反相C18条件或HILIC模式

2、极性大小

大极性物质(盐类等只溶于水的):选用离子交换色谱条件,或者HILIC模式条件

中等极性(有机酸、有机碱、多肽、糖等溶于水或乙腈的):选用反相C18条件

小极性(脂类、醚类等溶于正己烷或二氯甲烷的):选用正相silica条件

3、pKa值大小

待分析样品中主成分若成酸性,在水相流动相中会形成离子状态,导致在反相色谱上不保留,此时需将流动相pH值调低于主成分pKa-2,使得化合物在流动相中成分子状态;

若成碱性,在水相流动相中也会形成离子状态,此时需将流动相pH值调高于主成分pKa+2,这就要求采用耐碱的色谱柱。
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emmalee07
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