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液相色谱（LC）
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主题：【已应助】有没有人进行过β-胺基酮的高效液相检测啊，遇到难题了，浓度很大，不怎么出峰啊

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wencaoxi
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发表于：2019/09/04 16:42:34 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
这两天在做分析实验，用苯甲醛、苯胺、环己酮作为原料，进行mannich反应，得到β-胺基酮这种物质，但是进行高效液相检测的时候发现200μg/ml时，出的峰高才几，峰面积才几十，紫外监测的时候发现最大吸收波长在245nm处，所以检测的时候选的245nm作为紫外检测波长，同时流动相用的是甲醇/缓冲液，缓冲液为磷酸/三乙胺，pH值为3.49，v=0.5ml/min,T=35，求大神帮助下，刚接触色谱，不太懂啊，最后怀疑是缓冲液的问题，所以换成了水/甲醇，结果还是一样的，求指点 啊
推荐答案：小卡回复于2024/09/18
首先，峰高和峰面积小可能有几个原因。一方面可能是进样量不够，可以尝试增加进样量看看效果。另一方面，检测器的灵敏度设置是否合适呢？检查一下检测器的参数，看是否可以提高灵敏度。
关于紫外检测波长，虽然在 245nm 处有最大吸收，但也可以尝试在附近的波长范围再摸索一下，看是否有更好的响应。
流动相的选择也很关键。甲醇 / 缓冲液换成水 / 甲醇后效果一样，那可以考虑调整甲醇和水的比例，或者尝试其他的有机溶剂组合。同时，流速和柱温也可以再优化一下，比如稍微提高流速或者调整柱温看看对分离和检测的影响。
也有可能是样品本身的问题，比如样品的纯度不够或者在溶液中不稳定等。可以检查一下样品的制备过程，确保样品的质量。
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2024/9/18 11:27:11 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
首先，峰高和峰面积小可能有几个原因。一方面可能是进样量不够，可以尝试增加进样量看看效果。另一方面，检测器的灵敏度设置是否合适呢？检查一下检测器的参数，看是否可以提高灵敏度。
关于紫外检测波长，虽然在 245nm 处有最大吸收，但也可以尝试在附近的波长范围再摸索一下，看是否有更好的响应。
流动相的选择也很关键。甲醇 / 缓冲液换成水 / 甲醇后效果一样，那可以考虑调整甲醇和水的比例，或者尝试其他的有机溶剂组合。同时，流速和柱温也可以再优化一下，比如稍微提高流速或者调整柱温看看对分离和检测的影响。
也有可能是样品本身的问题，比如样品的纯度不够或者在溶液中不稳定等。可以检查一下样品的制备过程，确保样品的质量。
刚接触色谱确实会遇到很多问题，别着急，多尝试不同的条件，慢慢就能找到合适的方法
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小卡
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2024/9/18 11:27:49 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
首先，峰高和峰面积小可能有几个原因。一方面可能是进样量不够，可以尝试增加进样量看看效果。另一方面，检测器的灵敏度设置是否合适呢？检查一下检测器的参数，看是否可以提高灵敏度。
关于紫外检测波长，虽然在 245nm 处有最大吸收，但也可以尝试在附近的波长范围再摸索一下，看是否有更好的响应。
流动相的选择也很关键。甲醇 / 缓冲液换成水 / 甲醇后效果一样，那可以考虑调整甲醇和水的比例，或者尝试其他的有机溶剂组合。同时，流速和柱温也可以再优化一下，比如稍微提高流速或者调整柱温看看对分离和检测的影响。
也有可能是样品本身的问题，比如样品的纯度不够或者在溶液中不稳定等。可以检查一下样品的制备过程，确保样品的质量。
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