主题:【求助】亚硝酸盐实验若干不解之谜

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bsslk
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对亚硝酸盐实验有一些不解之处,希望各位帮帮忙解答解答:
我做这个亚硝酸盐实验简单一点概述:
样品:一般是酸菜、酸豆角、三文治火腿、火腿肠
试剂:氯化胺缓冲液 500ml水+20ml盐酸+50ml氢氧化胺定容1L
          氢氧化钠20g/L 20g氢氧化钠定容1L
          硫酸锌0.42mol/L 120 g硫酸锌定容1L
          对氨基苯磺酸辣 g+700ml水+300ml冰乙酸
          N-1-萘基乙二胺 0.1g+60%乙酸定容100,棕瓶冰箱稳定1周
          显色液 对氨基苯磺酸: N-1-萘基乙二胺=1:1 ,还有亚硝酸盐标准液和使用液,
仪器722S光度计
步骤: 1 样品处理
            10g碎样→①70ml水,12ml氢氧化钠样品洋调至PH=8.0→转移200ml容量瓶 →硫酸锌10ml→②无沉淀补加2-5ml氢氧化钠→60度水浴10分钟→冷却室温定容放置30分钟→过滤
        2 标准曲线绘制(略)
        3 样品测定
          10ml滤液于20比色管→4.5ml氯化胺缓冲液,2.5ml60%乙酸→5ml显色液→加水到刻度,摇匀→暗处25分钟→1cm比色杯550波长测定
下面有几个问题:
        1 步骤①70ml水,12ml氢氧化钠样品洋调至PH=8.0,这一步骤中它的意思我个人觉得不一定要加到12ml氢氧化钠,只要调至PH=8就可以,在我做实验的时候,调PH只是加很少,1ml都不到。希望各位解答解答。
        2 步骤②无沉淀补加2-5ml氢氧化钠,这一步骤我的问题还是跟第一个问题差不多,我个人觉得2-5ml并不重要,只要加到有沉淀生成就可以。还是希望高手解答解答。
        3 做这个实验也有空白吸光度大于样品吸光度,今天我做了两个酸菜样品,步骤是按照上述方法做的,两个样品液吸光度比较接近,但是比空白液要低,如果两个值倒过来还算正常(排除样品跟空白对调),希望各位帮我分析一下有什么因素会导致这个情况?
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我是风儿
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1 步骤①70ml水,12ml氢氧化钠样品洋调至PH=8.0,这一步骤中它的意思我个人觉得不一定要加到12ml氢氧化钠,只要调至PH=8就可以,在我做实验的时候,调PH只是加很少,1ml都不到。希望各位解答解答。:是向你这样的,毕竟食品基质的复杂性,每个样品的pH本底贡献是不一样的
        2 步骤②无沉淀补加2-5ml氢氧化钠,这一步骤我的问题还是跟第一个问题差不多,我个人觉得2-5ml并不重要,只要加到有沉淀生成就可以。还是希望高手解答解答。:这个要加入足够的氢氧化钠的,因为硫酸锌与氢氧化钠溶液作用,可以去除样液的蛋白质,只有足够的量才能使样品蛋白质去除的完全的
        3 做这个实验也有空白吸光度大于样品吸光度,今天我做了两个酸菜样品,步骤是按照上述方法做的,两个样品液吸光度比较接近,但是比空白液要低,如果两个值倒过来还算正常(排除样品跟空白对调),希望各位帮我分析一下有什么因素会导致这个情况?这种情况是有可能发生的:大量氯化钠的存在对测定有干扰,会使生成的偶氮化合物出现褪色的现象,
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