====PART 1 充满疑惑的开始====
2020年3月27日,这天周五,我像往常一样我又开始了兴ku奋bi的做实验。这次是做土壤和沉积物中多环芳烃的方法验证,具体指HJ786-2014这个标准。因为有两个检测器需要验证需要单独验证,所以我觉得先用DAD检测器对十六种多环芳烃进行全光谱扫描(190-800nm),这样就能很快发现十六种目标化合物的保留时间。
这里先说一下我当前的仪器条件:岛津LC-20AT四元低压液相系统,配合二极管阵列检测器(SPD-M20A)和荧光检测器(RF-20A),流动相准备了A乙腈B水C甲醇。流速控制在1ml/min。
想法很美好,但是现实却很残酷。我设置好梯度洗脱程序,进了一针1mg/L的乙腈十六种多环芳烃(没加十氟联苯),设置好计时闹钟,就去办公室忙别的去了。。。
当我还沉浸在三针之内必定将方法优化好的错觉之中的时候,第一针完成的结果却给我沉重的一击。我数来数去发现只有十五个峰。我擦,人品这么差????这十六种多环少说也做了十多次了,怎么这次这么奇怪?我那一个峰被老鼠吃掉了。
我一边让自己不要慌(其实慌得一批),一边开始排查原因:
排查原因 | 可能性 | |
1 | 有物质没有分离,两个物质重叠在一起了,只要调整梯度洗脱的程序,必定能发现踪迹。(90%) | 90% |
2 | 本佛山吴彦祖人品不好,买的标准品少了一个物质。 | 10% |
3 | 其他 | ?% |
针对第一个猜想的原因,我设置了不同的梯度洗脱程序,用来观察每个峰是否有分离成为两个峰的迹象,以下是我试验的梯度程序和结果。
====PART 02 不可思议的原因====
====PART 03 意外的结局====
附分析条件:时间程序(见图5):A乙腈B水;检测器DAD;色谱柱:C18硅胶柱 250mm*4.6mm*5um,型号为Shim-pack GIST(Sμm C18);流动相流速:1ml/min。
同时我还发现了另一个现象?
我按照实际情况,将十氟联苯的位置稍作调整,开始了方法验证之旅。至于这个情况,只要不影响定量分析,不管了。
====PART 04 一波三折====
根据上述时间程序,更改变参时间,匹配我自己的梯度洗脱方法。然后就得到了如下的图谱。
我有点想骂人了,又有点想哭。
然后我又根据HJ784,重新给化合物分组,重新设置时间程序。
发现第七个峰的积分出现问题,重新调整了变参时间。
====part 05 新的问题====
茚并(123-cd)芘和苯并(ghi)苝位置互换了。?
====引用文献====