版友可参考以下
注意事项:
1、采样
采样要做好记录,所采样品为即将上市或正在上市的蔬菜,样品要新鲜、洁净、不带泥浆。绿叶菜类蔬菜至少从不同5个点上取5株,对于大棵绿叶菜可取不同点上5株蔬菜外叶;茄果瓜类等大果型蔬菜至少从不同3个点上取3个果实。要求每个样品单独存放,并做好标记。
2、酶试剂保存
(1)未开封酶制剂存放在-18℃。
(2)每次检测时先将酶和底物取出,等降到室温后再进行配置。
(3)配置好的酶和底物多在4℃的冰箱内存放4天,使用时降到室温后重做对照。
(4)显色剂:存放于棕色瓶,避光保存,多使用30天。
(5)提取液:每次配置时清洗试剂瓶,配置好的试剂在常温下保存,如在冰箱内存放的,要在降到室温后再提取。
3、秤取
(1)叶菜类:至少取不同株上的5片叶片叠加,剪成1cm见方秤取1克。如芹菜、香菜、草头等羽状或小叶片直接剪叶片。
(2)茄果瓜类:取果实的表皮,1cm见方,至少从不同的3个果实上削取1克。
(3)特例:番茄要削取青、坚硬部分果皮。红椒、葱蒜类、芳香类蔬菜尽量减少伤口,可以采用同比例放大提取方法。
4.提取
(1)使用
移液枪或移液管提取5m1提取液,严禁使用针筒、试管等移液。
(2)烧杯中的蔬菜要放平,提取液要埋没蔬菜。
(3)提取时间:静置10分钟,使用振荡器3分钟。
(4)使用
移液枪提取2.5m1提取液,严禁直接倒入带有刻度的试管,目测。
5、酶制剂配置
(1)酶制剂配置一定要使用蒸馏水;(2)酶和底物等降到室温后再配置。
6、校正
(1)每次检测,速测仪都要进行调“0”和调“100”。
(2)联机后,每个通道先放入黑块,调“0”,之后取出黑块,放入比色皿,调“100”。
(3)在调“0”和调“100”时要等数值或曲线稳定5秒后,再点确认。
7、加试剂
(1)加试剂时
移液枪一定要垂直试管,不能让试剂留在试管壁上,加好后要摇匀。
(2)每组加酶和显色剂后要记录好时间,并列表每5分钟加一组酶和显色剂。在组反映15分钟后加底物。
8、对照
(1)每开一瓶酶试剂要做一次对照;
(2)对照时间要和检测时间同步,各为3分钟。
(3)对照可以在加酶和显色剂后直接加底物,马上上机检测。
9、上机检测
要求加一个底物马上上机点“检测”,不可以一组全部加好底物,上机,再一个一个点检测。
10、烧杯
每次使用完毕后要清洗干净倒置在干净纱布上,每周要进行一次浸泡清洗,保持烧杯壁干净透明,不留水垢。
11、试管
每次使用完毕后要清洗干净倒置在试管架上,每周要进行一次浸泡清洗,保持试管壁干净透明,不留水垢。
12、比色皿
(1)每次使用后用蒸馏水冲洗3次,方可再次使用。使用完清洗后要倒置,等水渍干后放入比色皿盒中保存。
(2)比色皿的光面不能用手触摸,当光面透明度下降时要更换新的使用。
13、洗液瓶
每次使用完毕后要清洗,并倒置。