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五加科人参属中重要的3种植物人参、西洋参、三七均为名贵中药材,红参为人参的栽培品经蒸制后的干燥根和根茎。现代药物化学研究表明,四者中主要的有效成分均为皂苷类化合物,迄今为止,从人参中分离得到近百种皂苷单体化合物,从西洋参和三七中也分离得到了数十种人参皂苷。4种中药有效成分中含有多个相同的单体皂苷类化合物,但也有其特征的皂苷成分,例如拟人参皂苷F11为西洋参特征性成分,三七皂苷R1为三七特征成分。现代药理作用研究表明,人参皂苷类化合物具有广泛的药理活性,如延缓衰老、提高免疫力、抗肿瘤、益智、抗氧化。而人参、红参、西洋参、三七,是《中国药典》2020 年版中以人参皂苷为指标成分进行定性鉴定和含量测定的中药。在含量分析中,需要色谱柱具有特殊的选择性,峰形对称性好、柱效高。 人参皂苷Rg1、Re是人参、红参和西洋参中的活性成份,这两个化合物具有非常相似的色谱性能,常规C18柱上通常很难实现1.5的分离度(即基线分离),例如在《中国药典》2020年版中,西洋参的含量测定需要柱温40 ℃,在此条件下,常规C18色谱柱基本不可能分离。为了更好的满足质量控制要求,我司使用了纳谱分析ChromCore 300 C18 4.6mm×250mm,5μm应用于人参、红参、西洋参、三七的检测中,得到了良好的使用效果。 1.人参和红参的含量测定本次试验以赛默飞UltiMate3000高效液相色谱仪为采集设备,采用纳谱分析ChromCore 300 C18 4.6mm×250mm,5μm色谱柱,以2020版《中国药典》中规定的条件,以乙腈为流动相A,以水为流动相B,按下表中的规定进行梯度洗脱;检测波长为203 nm。理论板数按人参皂苷Rg1峰计算应不低于6000。结果如图1、2、3、4: ![]()
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图1人参对照品图谱
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图2人参供试品图谱
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图3红参对照品图谱
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图4红参供试品图谱
从上述图谱可以看出来,采用纳谱分析ChromCore 300 C18 4.6mm×250mm,5μm色谱柱后,样品的峰型良好,人参皂苷Rg1、Re分离良好,理论塔板数达到要求。
2.西洋参的含量测定采用纳谱分析ChromCore 300 C18 4.6mm×250mm,5μm色谱柱,以2020版《中国药典》中规定的条件,以乙腈为流动相A,以0.1%磷酸溶液为流动相B,按下表中的规定进行梯度洗脱;检测波长为203 nm;柱温40℃。理论板数按人参皂苷Rb1峰计算应不低于5000。如图5、6:
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图5西洋参对照品图谱(40℃)
图6西洋参供试品图谱(40℃)
在没有ChromCore 300 C18 4.6mm×250mm,5μm色谱柱的时候,我摸索了ChromCore C18 4.6mm×250mm,5μm色谱柱的条件,在柱温降至25 ℃时,也能达到良好的分离效果,如图7、8:![]()
图7西洋参对照品图谱(25℃)
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图8西洋参供试品图谱(25℃)
综上ChromCore 300 C18 4.6mm×250mm,5μm色谱柱在药典要求的柱温40 ℃时,可以达到分离和柱效的要求,ChromCore C18 4.6mm×250mm,5μm色谱柱在柱温降至25 ℃时,也可以达到分离和柱效的分析要求。 3.三七的含量测定采用纳谱分析ChromCore 300 C18 4.6mm×250mm,5μm色谱柱,以2020版《中国药典》中规定的条件,以乙腈为流动相A,以水为流动相B,按下表中的规定进行梯度洗脱;检测波长为203 nm。理论板数按三七皂苷R1峰计算应不低于4000。如图9、10:![]()
图9三七对照品图谱
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图10三七供试品图谱
上述图谱也是采用纳谱分析ChromCore C18 4.6mm×250mm,5μm色谱柱,样品的峰型和分离度明显改善,塔板数也达到要求,结果准确可靠。
4. 我所了解的纳谱分析色谱柱性能4.1. ChromCore 300 C18(人参皂苷C18柱)性能特点:4.11.载碳量8.5%,对皂苷类化合物特别是对人参皂苷Rg1和Re具有特殊的选择性;4.13.300A的大孔径更耐皂苷类样品污染;4.14.使用Unisil单分散球形硅胶,其粒径大小和颗粒均一性的精确控制达到前所未有的水平。具有:优异的分离效果,传质速度快提升做样效率,极佳的峰对称性,优良的批次间重复性,优秀的碱耐受性。4.2. ChromCore C18(通用柱)性能特点:4.21.载碳量14%,180A的孔径更适合中药的分离,具有出峰时间快,柱效高,寿命长的特点;4.22.同样使用单分散球形硅胶,有更多成功的中药应用案例。 综上所述,ChromCore 300 C18(人参皂苷C18柱)经过特殊设计,针对人参、红参、西洋参中人参皂苷Rg1、Re和三七中的三七皂苷R1对乙腈敏感、难于分离的特点,采用了独特的技术,实现了人参皂苷Rg1和Re的高效分离,三七皂苷R1和人参皂苷Rg1的高效分离。是我推荐分析人参、红参、西洋参和三七的最佳选择。 公司名称:安徽益生源药业有限公司个人信息:胡××老师 地址:安徽省亳州市经济开发区亳菊路附近色谱柱信息:纳谱分析ChromCore 300 C18 5μm, 4.6×250mm,序列号:13538-001103纳谱分析ChromCore C18 5μm, 4.6×250mm,序列号:21538-002485