维权声明:本文为xiaoxiao523原创作品,本作者与仪器信息网是该作品合法使用者,该作品暂不对外授权转载。其他任何网站、组织、单位或个人等将该作品在本站以外的任何媒体任何形式出现均属侵权违法行为,我们将追究法律责任。
近期测外样发现丹参对色谱柱的柱效及柱温要求很高,现对实验中注意的问题做一下讨论:
1材料丹参药材(送检样);乙腈(色谱级),甲醇、磷酸(分析纯);丹参酮ⅡA对照品(购自中检院)。2 仪器与设备岛津液相LC-20AT配制UV/DAD检测器,安家Eclipse XDB C18色谱柱(250mm*4.6μm*5μm),超声波清洗器。3 实验方法3.1 色谱条件流动相(参照中国药典2020年第一部):乙腈-0.02%磷酸水为流动相,进行梯度洗脱;检测波长270nm;柱温:20 ℃;流速:1.0mL/min,进样量:10μL。3.2对照品溶液制备取丹参酮ⅡA对照品适量,精密称定,加甲醇制成每1mL含20 μg的溶液,即得。色谱图如下:
![]()
图1丹参酮ⅡA标准品(Eclipse XDB C18 )
3.3 供试品溶液的制备 (参照中国药典2020年版第一部)供试品溶液的制备取本品粉末(过三号筛)约0.3 g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入甲醇50 mL,密塞,称定重量,超声处理30分钟,放冷,再称定重量,用甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液,即得。测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μL,注入液相色谱仪,测定。以丹参酮ⅡA对照品为参照,以其相应的峰为S峰,计算隐丹参酮、丹参酮Ⅰ的相对保留时间。色谱图如下:
![]()
4 结果与讨论
液相色谱仪使用中关键因素是流动相和色谱柱,根据待测物质的化学性质,选择合适的色谱柱,但是测定丹参的过程中发现柱温对其影响也比较大,使得待测物质不能能够有效分离,从而不能准确定性定量。丹参药材注意的就是柱温一定要在20±2℃左右,进样才能达到有效分离。