1、点样量确定

对照品溶液制备：取5-O-甲基维斯阿米醇苷对照品约2mg，精密称定，置2ml量瓶中，加乙醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得。

供试品溶液制备：取本品约8g，研细，精密称定，置具塞锥形瓶中，加丙酮20ml，超声处理20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇1ml使溶解，作为供试品溶液。

照薄层色谱法（《中国药典》2020年版通则 0502）试验，分别吸取上述溶液点于同一硅胶GF₂₅₄薄层板上，以三氯甲烷-甲醇（4:1）为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（254nm）下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

结论：供试品点样量为10μL时，斑点清晰，与对照品相当，因此，确定供试品点样量为10μL。

2、专属性

溶液配制

对照品溶液使用：使用“1”项下所配。

供试品溶液使用：使用“1”项下所配。

阴性样品制备

防风阴性样品制备：旋覆花6g，桔梗6g，前胡6g，荆芥穗5g，紫菀10g，百部6g，姜半夏6g，陈皮5g，白芍5g，当归6g，党参8g，甘草5g，加水浸泡30min，煎煮三次，每次1小时，滤液浓缩至适量，蒸干，即得。

阴性样品溶液：取防风阴性样品约4g，研细，精密称定，置具塞锥形瓶中，加丙酮20ml，超声处理20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇1ml使溶解，作为阴性样品溶液。

按照2.1确定的点样量，分别取上述溶液，点于同一硅胶GF₂₅₄薄层板上，以三氯甲烷-甲醇（4:1）为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（254nm）下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

结论：阴性样品色谱中，在与对照品色谱及供试品色谱相应的位置上，阴性无干扰，本方法专属性良好。

3、耐用性

分别考察不同批号薄层板、不同温度、不同湿度的耐用性。

对照品溶液使用：使用“1”项下所配。

供试品溶液使用：使用“1”项下所配。

按照2.1确定的点样量，分别取上述溶液，点于同一硅胶GF₂₅₄薄层板上，以三氯甲烷-甲醇（4:1）为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（254nm）下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

（1）不同批号薄层板

分别将上述溶液点于同一硅胶GF₂₅₄薄层板上，以三氯甲烷-甲醇（4:1）为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（254nm）下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。以确定薄层板批号变更时方法的可行性和适用性。

（2）不同温度下展开

分别将上述溶液点于同一硅胶GF₂₅₄薄层板上，以三氯甲烷-甲醇（4:1）为展开剂，分别于不同温度下（4℃冰箱、40℃电热恒温干燥箱）展开，取出，晾干，置紫外光灯（254nm）下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。以确定方法展开温度变化时的适用性。