西达本胺抑制SCLC细胞增殖和凋亡

CCK-8药敏实验结果表明，SCLC细胞系H69、H446、H526、DMS114经不同浓度西达本胺处理 24、48、72、96、120 h后，细胞产生明显的增殖抑制现象，且随着药物浓度增加及作用时间延长，抑制作用逐渐增强，呈现出时间-浓度依赖性，如图2所示。同时得到西达本胺对四种细胞系作用72h后的IC10、IC20、IC50见表1-8。结果显示四种细胞系对西达本胺均较为敏感，其中，与H69相比，DMS114对西达本胺相对不敏感。

不同浓度西达本胺作用不同时间后对H69的增殖抑制情况

表1-8 西达本胺作用72 h后达到不同抑制效果的药物浓度（μmol/L）

细胞名称	IC10	IC20	IC50
H69	0.423	0.632	2.916
H446	0.404	0.571	1.033
H526	0.118	0.261	1.015
DMS114	1.272	2.815	10.943

西达本胺改变SCLC细胞形态

不同浓度（0、IC20、IC50）西达本胺作用于H69、H446、H526、DMS114细胞48及72 h后在显微镜下观察细胞形态改变如图1-3所示。随着药物浓度及作用时间的增加，SCLC细胞系形态发生了变化，细胞增殖率减低。H69团状细胞减少，单个凋亡细胞增多；H446贴壁细胞减少，凋亡细胞增多，触角伸长，形状变得不规则；H526细胞体积缩小，由片状变为球形团块，周围散在大量凋亡细胞；DMS114由椭圆形变为长梭形，细胞内颗粒物增多，可见空泡，出现凋亡小体。由此可见，低剂量西达本胺即可影响SCLC细胞形态，促进细胞凋亡，四种细胞系对西达本胺均较为敏感。

西达本胺诱导SCLC细胞凋亡

流式结果显示，用不同浓度（0、IC20、IC50）西达本胺处理SCLC细胞系48 h后，四种亚型细胞系凋亡率均上升，且与加药浓度成正比，如图1-4 A所示。48 h检测在IC20、IC50浓度下H69细胞凋亡率为8.45%和14.46%，H446细胞凋亡率为8.88%和41.6%，H526细胞凋亡率为11.48%和20.77%，DMS114细胞凋亡率为11.83%和16.07%，与对照组相比，差异具有统计学意义（P<0.05）（图1-4 B）。为了进一步检测西达本胺在H69、H446、H526、DMS114四种细胞系中的作用差异，我们用1 μmol/L的西达本胺分别处理H69、H446、H526、DMS114细胞48h后进行流式细胞仪检测，结果如图1-4 C所示，与DMS114比较，H69、H446、H526对西达本胺更敏感。

图不同浓度（0、IC20、IC50）西达本胺作用48 h后H69、H446、H526、DMS114细胞凋亡率柱状图

. 1 μmol /L西达本胺作用48 h后对H69、H446、H526、DMS114细胞凋亡的影响

西达本胺抑制SCLC细胞克隆

用不同浓度（0、IC20、IC50）西达本胺处理SCLC细胞系48 h后，在细胞克隆第14天，镜下观察细胞克隆情况并拍照（图1-5 A），细胞单克隆数量随加药浓度增加而减少。各组细胞克隆形成率绘制成柱状图，如图1-5 B所示，随着加药浓度增加细胞克隆形成率逐渐减小，与对照组相比，差异具有统计学意义（P<0.05）。H446、DMS114细胞进行了平板克隆实验，随着加药浓度的增加，克隆数明显减少，结果如图所示。