本人最近刚接触
液相,遇到一些问题,想请教一下各位,非常感谢!
所用设备为岛津LC-20A,柱子为安捷伦的C18柱(4.6*150mm, 2.7 μm),我想通过
液相来检测所制样品中的多肽成分,我一开始使用的梯度洗脱程序见图1;流动相A:0.1%三氟乙酸溶液,B:乙腈(含0.1%三氟乙酸);柱温设置为30℃,流量为0.8 mL/min,检测波长210nm,进样量10uL。
通过图1程序跑出来的样本效果很差,因为我做标品时观察到多肽在25min后才出峰,而用上述程序跑出的结果见图2,峰出现重叠,物质分不出。
然后我优化了一下梯度洗脱的程序并跑了一下
液相,见图3和4
个人感觉是分开了,但基线漂移严重。想请教一下这种情况正常吗,还有梯度洗脱程序还可以怎么优化吗?感谢!