发帖人:holmes8519
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问题描述:
如何对土壤样品中的羧酸和醛进行衍生化处理?解答:对于衍生化反应有以下要求:1
.衍生化反应既迅速又完全,便于计算衍生物的含量及定量计算;2
.衍生反应的生成物在分析过程中性能要稳定;3
.衍生剂、衍生产物和衍生副产物容易分离。对于醛类的衍生化,用DNPH
进行衍生化符合以上要求,且操作简单。依据《土壤和沉积物 醛、酮类化合物的测定 高效液相色谱法》(HJ 997-2018
), 参考步骤如下:取100 mL
待衍生化溶液,加入4 mL
缓冲溶液(pH
≈3
),加入6 mL
衍生剂(ρDNPH=3.00 mg/mL
),置于恒温振荡器中,40℃
振荡1 h
。图4-1 DNPH衍生化反应原理
对于羧酸类的衍生化,BSTFA
:TMCS
(99:1
)是最常用的硅烷化试剂之一,硅烷化反应也全部满足以上要求。参考步骤如下:在吹干的提取物残渣中加入100 μL
的BSTFA
:TMCS
(99:1
),加入50 μL
的吡啶。衍生化小瓶加盖后在60 ℃
衍生化30 min
,视化合物而定。衍生化后可直接进样1-2
μl
。残渣吹干无水分,十分关键,衍生化试剂BSTFA遇水立即分解。在南方潮湿季节进行这一反应时,特别要注意防潮。
图4-2硅烷化反应原理