主题：【分享】【金秋计划】微生物检测方法

检测方法1：生长量测定法。
①体积测量法。
通过测定一定体积培养液中所含菌丝的量来反映微生物的生长状况。菌丝浓度测定法是大规模工业发酵生产上微生物生长的一个重要监测指标。这种方法简单快速，但该实验误差较大。
②称干重法。
利用离心或过滤法进行测定。一般干重为湿重10-20%。称干重法较为烦琐，通常获取的微生物产品为菌体时，常采用这种方法，如干酵母、饲料等。
③比浊法。（常用）
微生物的生长引起培养物混浊度的增高。通过紫外分光光度计测定一定波长下的吸光值，判断微生物的生长状况。该法主要用于发酵工业菌体生长监测。
检测方法2：微生物计数法。
①染色计数法。
为了弥补一些微生物在油镜下不易观察计数，而普通计数法又无法区分死细胞和活细胞，便可以采取染色计数法。常见染料包括中性红、台盼蓝、甲基蓝、美蓝等。
②液体稀释法。（常用）
对未知菌样做连续十倍系列稀释，根据估计数，从最适宜的三个连续的10倍稀释液中各取5毫升试样，接种1毫升到3组共15只装培养液的试管中，经培养后记录每个稀释度出现生长的试管数，然后查最大或然数表MPN得出菌样的含菌数，根据样品稀释倍数计算出活菌含量。
③平板菌落计数法。（常用）
最常用的活菌计数法，该方法不仅可以得出菌液中活菌的含菌数，还可以将菌液中的细菌进行分离培养，获得单克隆。
④试纸条法。
在平板计数法的基础上，发展了试纸条产品以供快速计数。该方法快速准确，避免了平板计数法的人为操作误差。
检测方法3：生理指标法。
①测定含氮量。
大多数细菌的含氮量为干重的12.5%，根据含氮量×6.25，即可测定粗蛋白的含量。含氮量的测定方法，包括用硫酸、过氯酸、磷酸等消化法和杜马斯法。
②测定含碳量。
将少量样品混入1毫升水或缓冲液中，用2毫升2%的K2Cr2O7溶液在100℃下加热30分钟后冷却，加水稀释至5毫升，在580nm的波长下测量吸光度，绘制标准曲线计算生长量。
③还原糖测定法。
还原糖通常是指单糖或寡糖，可以被微生物直接利用，通过还原糖的测定可间接反映微生物的生长状况，常用于大规模工业发酵生产上微生物生长的常规监测。
④其他生理物质的测定。
核酸、ATP等含量以及产酸、产气，产CO2、耗氧、产热等指标，都可用于生长量的测定。