主题：〖有奖讨论〗谈谈你对气相了解多少？【本月话题——第四期】

原文由 chengjingbao 发表:
气相色谱搞了二十多年,我觉得还是很无知.只会些拆拆修修类的,偶而配几种柱子,填料还是跟厂家买的,电路板出故障,只能判断和更换,没办法修理,也不敢修,责任谁负?自配气路还得参考厂家的原设置.程序上更是一无是处,从最初的记录仪,进化为积分仪,再到后来的工作站,工作站不断升级,要学的更多.色谱更新了三四代,气路由手动到自动.我们能改的确实不多了.何况现在仪器出故障,程序和操作不当引起的居多,硬件出问题的越来越少了.现在的在线色谱,连做实验的机会都没有了.检测器咱只玩过TCD和FID,可怜啊!

你说的也是啊，干的再多也赶不上步伐．好象你知道的好多啊，我们空气压缩机坏了，保险丝坏了，换了没用，发热，不知道怎么了．今天刚送去修了


批注：时代在进步我们也被时代推着前进。你的压缩机发热是不是线路没接好？——by：疯子哥

问题1：为什么有些峰出现拖尾？
答：①这可能是由于进样口或色谱柱不干净，或色谱柱切割不正确。冷却进样口、关闭气流并更换或清洁进样口部件，包括进样口衬管和金密封垫。取出色谱柱。切掉一段色谱柱以清除不挥发性残留物、隔垫碎屑和密封圈碎片。这段色谱柱的长度可以是 1 英寸到 1 米，如果需要的话，可以更长。使用正确的切割工具来切割色谱柱。如果切割不好，则可能导致样品吸收。使用黄铜刷子或氧化铝粉末等软质研磨剂擦洗进样口钢质内壁。在重新安装其他部件前，要确保已将进样口清洗干净。对于 5890，卸下分流出口管路并用溶剂清洗是比较好的方式。
②在不分流方式下进行分析时，不分流时间过长可能导致拖尾。通常时间应在 0.5 至 1 分钟范围内。
③未吹扫（死）体积也可能导致拖尾。确保在进样器和检测器中色谱柱安装正确。
④如果考虑色谱柱部分流失，则可以使用色谱柱前的保留间隙（制备色谱柱）。如果没有降低色谱柱效率，则可以将其切割掉或更换掉，并可延长色谱柱的寿命。但要注意保留间隙和分析色谱柱的连接可能引起泄漏和样品吸收。
问题2：如何改善峰形？（前伸峰、拖尾峰）
答：前伸峰是由于色谱柱过载。当一种或多种化合物的进样量超过色谱柱固定相容量时，可能发生这种情况。液相膜越薄，色谱柱中保留的每种化合物就越少。 这涉及到进样体积和进样中每个峰的化合物浓度。通过减少进样量、分流样品或进样浓度较低的样品，可减小进样体积。
问题3：什么原因导致峰比原来大，而且出现的早？
答：过快、过大的峰通常是由于从分流口和隔垫吹扫口排出的载气减少，而更多的进入色谱柱；因此增加柱头压力，可降低分流比。检查分流出品的气体流量，如需调整分流比则对调整此流量。如果问题依然存在，可卸下并清洁分流口。这个问题也可能由于柱头压调节阀有问题而引起。
问题4：何时需更换隔垫或衬管？
答：通常比较好的隔垫至少能保证 100 次进样不发生问题。 当色谱特征说明衬管有问题时，需要更换衬管。影响隔垫寿命的因素有注射器尺寸、进样口温度和压力，当然受压力影响的程度比较小。影响衬管寿命的因素通常是样品的清洁度。应该根据仪器维护历史记录来选择色谱需要的特定程序。
问题5：随着进样室温度升高，对分析物分解有影响吗？
答：如果化合物热稳定性差，分析物分解可能会带来一些问题。这在制药工业中比较常见。如果药物或中间体热分解温度低于进样口温度，则分析结果中将出现特殊的峰或与目标分析物发生反应。
问题6：排除色谱柱流失问题的最佳方法是什么？
答：诊断色谱柱是否存在流失问题的最佳方法是第一次在方法条件下安装色谱柱时，做一次空白色谱图，然后将最近的运行和空白运行色谱图对比。如果在空白运行中产生了很多峰，则色谱柱性能改变，这可能是由于载气中含有氧气，也可能是由于样品残留。如果有 GC-MS，则低极性色谱柱的典型流失离子（例如 DB/HP-1 或 5）质/荷比 m/z 将为 207、73、281、355 等，大多数为环硅氧烷。
问题7：如何得知分流/不分流进样口的进样体积不超过进样口衬管反应室的容积？
答：如果不是多次重复进样引起精度问题，则不会经常发生这个问题。精度问题经常是由于不合适的进样体积引起。因为分流进样的进样口流速比较高，样品进出进样口比不分流快得多。同样地，由于溶剂没有时间扩散到衬管外，因此分流模式进样体积要求没有那么严格。实际上，1 微升是比较合适的，由于降低分流比对增大峰面积比增加进样量更有效。然而，不分流进样要求要严格的多，建议使用蒸汽体积计算器估算最终的扩散体积。
问题8：排除色谱柱流失问题的最佳方法是什么？
答：诊断色谱柱是否存在流失问题的最佳方法是第一次在方法条件下安装色谱柱时，做一次空白色谱图，然后将最近的运行和空白运行色谱图对比。如果在空白运行中产生了很多峰，则色谱柱性能改变，这可能是由于载气中含有氧气，也可能是由于样品残留。如果有 GC-MS，则低极性色谱柱的典型流失离子（例如 DB/HP-1 或 5）质/荷比 m/z 将为 207、73、281、355 等，大多数为环硅氧烷。
问题9：色谱分析运行时，标样和样品的峰均随时间加宽 ，这正常吗？
答：如果保留时间没有很大区别，只是加宽的峰拖尾，可能表明有活化点。如果加宽的峰是对称的，可能是由于正常的色谱柱“损耗和流失”。如果峰前伸，说明色谱柱过载。
问题10：为什么在空白运行中出现了我的样品组分峰？
答：有可能是由于样品制备或系统清洁问题。尝试在样品和空白样品制备中使用新溶剂，并在样品清洗瓶中装上新溶剂。尝试使用新的注射器和隔垫。取出并清洗分流出口管路。在未进样情况下运行以观察仅加热色谱柱有无峰出现。
问题10：什么原因导致基线不稳和干扰？
答：1. 进样针受污染。清洗进样针；做一浓缩试验，载气线路可能也要清洗。
2. 色谱柱受污染。烘焙色谱柱，限定时间1-2h。
3. 检测器不平衡。检测器一般需要24h才能得到平衡。
4. 在程序升温的时候改变载气流速（在很多情况下为正常现象）。
问题11：什么原因导致过多的基线噪音？
答：1. 进样针受污染。清洗进样针；做一浓缩试验，载气线路可能也要清洗。
2. 色谱柱受污染。烘焙色谱柱，限定时间1-2h。
3. 检测器不平衡。清洗检测器，通常噪音不是突然增大而是逐渐产生。
4. 污染或载气质量降低。使用高质量的载气或检查气体是否泄露。一般在换载气钢瓶的时候会突然发生。
5. 柱子安装太过。可重新安装。
6. 载气流速不合适。重新设定流速。
7. 与MS、ECD、TCD联用时发生漏洞，查找并消除漏洞即可。
8. 检测器的灯或电子倍增管老化。
问题12：什么原因导致峰形改变？
答：1.检测器响应改变。检查气体流速、温度和设置。
2.样品的浓度改变。检查并检验样品的浓度，样品的蒸发或成分的改变都可能引起。
3. 色谱柱受污染。
问题13：如果分离度下降，如何处理？
1.柱温不同。检查柱温。
2.不同的色谱柱的维数和相位。核实色谱柱的特性。
3.改变载气流速。
4.色谱柱受污染，应用溶媒清洗柱子。
5.进样器的改变。检查进样器的设置。
6.样品的浓度或溶解能力的改变。试用一个不同的浓度。
问题14：如果出现分裂峰，如何处理？
1.试着改变一下进样方法。
2.改变溶媒，使其成为单一的溶媒。
3.重新安装色谱柱。
4.减小进样温度。
问题15：如果怀疑进样器或载气被污染了，应采用何种检测？
1. GC在40-50℃保持8小时或8小时以上。
2. 运行一个空白分析（开启GC，但不进样）。
3. 收集空白分析的色谱图。
4. 第一个空白分析完成以后立即开始第二次，二者间隔时间不要超过5min。
5. 收集第二次空白分析的色谱图，并与第一次的图谱进行比较。
6. 假如在第一次时，峰图包含了大量的色谱峰，而且基线不稳定，那就暗示了
毛细管柱被污染了（进样器或载气被污染）。
7. 假如两次色谱峰图都包含少数的峰或基线的微小漂移，那就可以假定进样器
或载气是比较干净的。假如
8. 假如两次色谱峰图都包含重大数量的噪音和（或）基线漂移，那通常也就表
明了进样器或载气被污染了。
问题16：保护柱应为多长？
比较有代表性的保护柱柱长为0.5-10m。虽然没有确定的长度适合所有的样品，但是以下一些建议也可以参考。假如样品相对来说比较纯净，溶质为极性，保护柱应该在0.5-1.0m之间；若样品相对来说不纯净，保护柱应该适当长些。5-10m长的主要是为了维护单一系统。长保护柱允许使用者减去大约1m而代替整个保护柱安装


批注：谢谢你提供的资料，不知道你在实践中又遇到哪些问题？——by：疯子哥

算是比了解，可以维修一些常见的故障，自己可以涂制毛细管柱。


批注：毛细管的涂制经验能否分享下？能否将其方法拿来与大家一起阅读？——by：疯子哥

对气路比较了解，可以安装检漏
可以拆装FID、TCD，其他就了解甚少
对白酒、啤酒气相分析比较多，配过相应的标准样品
可以根据资料对不同样品选择柱子



批注：其实捡漏是比较容易的，我们真的找不出漏气的地方，可以分段分析。——by：疯子哥

凡是分子质量不大又有一定挥发性、在柱温下不分解的物质或分子量较大但可衍生为易挥发的化合物都可以用气相色谱仪进行分析;难分离物质的相对(调整)保留值(α)在1.2以上的可用填充柱气相色谱仪或毛细管气相色谱仪进行分析； α值在1.15以下的，应选用毛细管气相色谱进行分析；α值在1.15～1.20之间，如果填充柱可以满足分离要求就用填充柱，否则可以用短毛细管柱分析



批注：你对GC检测的物质的类型分析的很详细，其实还有条，GC是不能分析盐类物质的，对柱子损害很大——by疯子哥

使用气相觉得最能学到东西的时候，就是机器出现问题，这个时候会给厂家的工程师交流，会在网上寻找相关帖子，会亲手拆了机器排除问题。所以在用气相时碰到问题才是最可幸的。


批注：碰到问题我们要即时解决，自己不能解决的在工程师的指引下会有更大的收获的，不过网络也是个学习的好方法，我们这里就有很多书本上你学不到的知识。——by：疯子哥

批注:不知道你的粗略了解是什么程度?虽然你写了关于GC的原理以及根据流动相来分类,不知道你对其有没有什么深刻的理解?你对GC的构成的情况又是如何?_____by:疯子哥
只是看过一些资料，了解一些皮毛。
色谱法分类
按两相的物理状态可分为：气相色谱法(GC)和液相色谱法(LC)。气相色谱法适用于分离挥发性化合物。GC根据固定相不同又可分为气固色谱法(GSC)和气液色谱法(GLC)，其中以GLC应用最广。液相色谱法适用于分离低挥发性或非挥发性、热稳定性差的物质。LC同样可分为液固色谱法(LSC)和液液色谱法(LLC)。此外还有超临界流体色谱法(SFC)，它以超临界流体（界于气体和液体之间的一种物相）为流动相（常用CO2），因其扩散系数大，能很快达到平衡，故分析时间短，特别适用于手性化合物的拆分。
按原理分为吸附色谱法(AC)、分配色谱法(DC)、离子交换色谱法(IEC)、排阻色谱法(EC，又称分子筛、凝胶过滤(GFC)、凝胶渗透色谱法(GPC）和亲和色谱法。(此外还有电泳。)
按操作形式可分为纸色谱法(PC)、薄层色谱法(TLC)、柱色谱法。
色谱分离原理
高效液相色谱法按分离机制的不同分为液固吸附色谱法、液液分配色谱法（正相与反相）、离子交换色谱法、离子对色谱法及分子排阻色谱法。
1．液固色谱法　使用固体吸附剂，被分离组分在色谱柱上分离原理是根据固定相对组分吸附力大小不同而分离。分离过程是一个吸附－解吸附的平衡过程。常用的吸附剂为硅胶或氧化铝，粒度5~10μm。适用于分离分子量200~1000的组分，大多数用于非离子型化合物，离子型化合物易产生拖尾。常用于分离同分异构体。
2．液液色谱法　使用将特定的液态物质涂于担体表面，或化学键合于担体表面而形成的固定相，分离原理是根据被分离的组分在流动相和固定相中溶解度不同而分离。分离过程是一个分配平衡过程。



批注：你对资料了解的比较透彻，不过在实践中你将你的知识应用到了没？——by：疯子哥

有价值，有收获



批注： 不知道你的价值和收获从何而来？为何不拿出来让大家分享下？——by：疯子哥

请发表你的看法，谢谢——by：疯子哥

我们前段时间买了一台6890，不过因为自己对液相比较熟，气相检测作的不多，也就是一点农残和溶剂残留的检测。顶多是个够操作资格吧。

下一步是方法开发，要求比较高，所以正在努力学习中。。。


批注：希望你能把6890学到的知识拿到这里与大家一起交流分享——by：疯子哥