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主题：【求助】日立的f4500荧光分光光度计

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westyouday

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发表于：2007/11/21 00:26:00 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

例如使用日立的f4500荧光分光光度计，测试固体样品，设定激发波长在254nm，在发射光谱中在510nm左右出现了一个不属于样品的尖锐的峰，不知道如何去除这个峰，因为样品的发射峰也在这个谱段，这个尖锐的峰在样品的两个发射峰之间。

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2007/11/21 9:08:00 沙发管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 westyouday 发表:
例如使用日立的f4500荧光分光光度计，测试固体样品，设定激发波长在254nm，在发射光谱中在510nm左右出现了一个不属于样品的尖锐的峰，不知道如何去除这个峰，因为样品的发射峰也在这个谱段，这个尖锐的峰在样品的两个发射峰之间。

(1)510nm的峰是激发波长254nm的二级散射光谱,也称为"鬼峰";
(2)如果可以清楚的区分样品峰和鬼峰,并不影响测定一般可以不用除去鬼峰;
(3)如果坚持要除去鬼峰可以使用带通滤光片;

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2007/11/21 19:34:00 板凳管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

收到，非常感谢

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mengxianfeng

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2008/5/5 15:15:01 马扎管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

我想问一下你选择254NM激发波长是根据什么选的我想测激发和发射光谱，里面有个EXWL 和EMWL不知道怎么确定，谢谢指教啊

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2008/5/5 15:30:07 地毯管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

根据测的荧光粉决定的。这两个值一般选择激发和发射光谱的峰值。如果应用于固定的激发源，则根据激发源的发射峰值来确定。

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mengxianfeng

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2008/5/5 20:54:40 地板管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

你好谢谢你的回答由于是第一次接触所以不是很懂能否再给予充分说明一下比如如何找最大激发和发射峰谢谢啊

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ignorance

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2010/5/7 10:30:17 6楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 (mengxianfeng) 发表:
你好谢谢你的回答由于是第一次接触所以不是很懂能否再给予充分说明一下比如如何找最大激发和发射峰谢谢啊

一、点击“方法”图标。在打开的框图中，点击“一般” 图标，选择“波长扫描”方式；点击“仪器”图标，选择扫描方式为“发射”，固定激发波长为某一整数值X（我常设为300），发射扫描开始波长为“X + 20”nm，发射扫描结束波长为“2X－20”nm，但发射扫描结束波长最大不超过900nm。

二、点击“测量”图标，开始进行发射光谱扫描。仪器结束扫描后自动给出相应的测量参数和最大发射波长及对应的荧光强度。

三、点击“方法”图标。在打开的框图中，点击“仪器”图标，选择扫描方式为“激发”，发射波长选择刚才所得的最大发射波长数值Y，激发扫描开始波长为“1/2Y + 20”nm，激发扫描结束波长为“Y－20”nm。

四、点击“测量”图标，开始进行激发光谱扫描。仪器结束扫描后自动给出相应的测量参数和最大激发波长及对应的荧光强度。

五、将激发波长设为“八、”确定的数值。重复“1、”至“4、”的步骤。直至获得的激发波长和发射波长的数值不再明显改变为止。

该帖子作者被版主 Pfz1985加 2积分， 2经验，加分理由：积极应助！

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2010/10/7 21:39:43 7楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 ignorance(ignorance) 发表:
原文由 (mengxianfeng) 发表:
你好谢谢你的回答由于是第一次接触所以不是很懂能否再给予充分说明一下比如如何找最大激发和发射峰谢谢啊

一、点击“方法”图标。在打开的框图中，点击“一般” 图标，选择“波长扫描”方式；点击“仪器”图标，选择扫描方式为“发射”，固定激发波长为某一整数值X（我常设为300），发射扫描开始波长为“X + 20”nm，发射扫描结束波长为“2X－20”nm，但发射扫描结束波长最大不超过900nm。

二、点击“测量”图标，开始进行发射光谱扫描。仪器结束扫描后自动给出相应的测量参数和最大发射波长及对应的荧光强度。

三、点击“方法”图标。在打开的框图中，点击“仪器”图标，选择扫描方式为“激发”，发射波长选择刚才所得的最大发射波长数值Y，激发扫描开始波长为“1/2Y + 20”nm，激发扫描结束波长为“Y－20”nm。

四、点击“测量”图标，开始进行激发光谱扫描。仪器结束扫描后自动给出相应的测量参数和最大激发波长及对应的荧光强度。

五、将激发波长设为“八、”确定的数值。重复“1、”至“4、”的步骤。直至获得的激发波长和发射波长的数值不再明显改变为止。

你好，从回复看你很专业，我有几个问题可以向你请教吗？
1、为什么要这样测？可以介绍下吗？
2、如果溶剂是水的话，需要处理下吗？
3、改变激发波长，发射光谱不是形状不变，只是强度改变吗？可我的为什么强度形状都变化呢？
4、如果样品是悬浮液，如此反复测试，对结果应该有影响吧？又怎么处理？期待着你的回复！
谢谢！

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