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紫外可见分光光度计（UV）
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主题：【求助】求教一个BAEE作底物测酶活的问题！~

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coxcoo
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发表于：2008/04/07 22:04:33 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
TU-1800的分光光度计，用BAEE在253nm测吸光值，AUTOZERO的时候始终不能调零，数值重现性很差，空白多次出现负值，后来用两个比色杯测同一个样品的吸光值都相差0.6左右，请问这是怎么回事，该怎么解决？
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2008/4/8 19:36:48 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
BAEE作底物，请具体说说过程，我最近也在做酶学实验呢，大家一起探讨一下
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coxcoo
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2008/4/16 16:54:39 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
测一个蛋白酶的酶活，过程不复杂，就是不太好把握，刚开始做。
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初学者&九点虎
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2008/4/16 18:16:57 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 coxcoo 发表:
测一个蛋白酶的酶活，过程不复杂，就是不太好把握，刚开始做。

酶很容易失活，请多注意，还有就是用好缓冲溶液，别的没什么
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golvt_lee
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2008/4/16 21:18:18 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
楼主问题发生原因有两种可能，要么仪器，要么样品本身。

建议先不放入样品测量，在同样工作参数下，校一下零（Autozero)看看，如果能校，就说明仪器正常，否则，仪器有问题，比如灯能量太低，光学部件多，密封又不太好，致使能量下降多等（因紫外区能量本身相对低，能量若损失大的话，很有可能会出现这种测量结果的）

若仪器正常，那就很可能是样品稳定性不好。这种情况，刚配制好样品后，建议你用仪器的时间扫描功能，监测其变化，10min左右基本上就能判断了，
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